Anticorps Polyclonal Anti-Phospho-Histone H3-S10 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16695 / P68431

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H3.1t (H3.4)

• L'histone H3.1t (également connue sous le nom de H3.4, H3/g, codée par le gène H3-4/HIST3H3) est une variante centrale de l'histone spécifique aux testicules qui remplace l'histone H3 canonique dans les nucléosomes au cours de la spermatogenèse.
• En tant que composant central du nucléosome, l'histone H3.1t enroule et compacter l'ADN en chromatine, limitant l'accessibilité aux machineries de transcription, de réparation et de réplication.
• La famille de gènes H3 comprend plusieurs variants dépendants de la réplication (tels que HIST1H3 et HIST2H3) et indépendants de la réplication (H3.3), H3.1t étant un membre spécifique à un tissu.
• L'histone H3.1t se localise dans le noyau et est un composant de la chromatine chromosomique, où elle subit d'importantes modifications post-traductionnelles (PTM), notamment la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination, collectivement appelées le code des histones.
• La phosphorylation de l'histone H3 à la Sérine 10 (H3S10ph) est un marqueur mitotique clé, associé à la condensation des chromosomes, et joue également un rôle dans l'activation transcriptionnelle des gènes à réponse immédiate.
• La spécificité tissulaire de H3.1t pour les cellules testiculaires suggère une fonction spécialisée dans le remodelage de la chromatine lors de la spermatogenèse, contribuant potentiellement à la fertilité masculine.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Cet anticorps a été élevé contre un peptide phospho-synthétique correspondant à la Sérine 10 de l'histone H3 humaine. Pour assurer une détection spécifique de la phosphorylation, envisagez d'utiliser des extraits cellulaires traités à la phosphatase ou non stimulés comme témoins négatifs dans le Western blot.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), des étapes de perméabilisation et de récupération de l'antigène peuvent être nécessaires ; optimisez les conditions de fixation et de blocage pour préserver l'épitope phosphorylé.
• La large réactivité croisée d'espèce prédite suggère que l'anticorps peut détecter la phospho-H3-S10 chez les vertébrés ; cependant, une validation avec des échantillons de témoins positifs et négatifs pour chaque espèce est recommandée.
• Compte tenu du faible poids moléculaire de l'histone H3 (~15 kDa), utilisez des gels SDS-PAGE à pourcentage élevé (ex : 15 %) et des tailles de pores de membrane appropriées (0,2 µm) pour un transfert et une détection efficaces.
• Dans les applications ELISA et IF, titrez l'anticorps pour déterminer la dilution de travail optimale, car les concentrations absolues n'ont pas été déterminées empiriquement pour ce produit.

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