Anticorps monoclonal anti-Phospho-GSK3β-S9 pour WB, ELISA - P49841

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GSK3β

• La GSK3β fonctionne comme une kinase constitutive active qui régule négativement la synthèse du glycogène, la synthèse des protéines et la signalisation Wnt en phosphorylant des substrats clés tels que GYS1, EIF2B et CTNNB1/bêta-caténine. Références associées : PMID:11430833, PMID:12554650, PMID:8397507

• Dans la voie Wnt, GSK3β forme un complexe de destruction avec APC et AXIN1, phosphorylant la bêta-caténine pour favoriser sa dégradation dépendante de l'ubiquitine, inhibant ainsi l'expression des gènes cibles de Wnt. Références associées : PMID:12554650

• La GSK3β phosphoryle MAPT/TAU sur Thr-548, réduisant considérablement sa capacité à stabiliser les microtubules, et est impliquée dans la formation des enchevêtrements neurofibrillaires dans la maladie d'Alzheimer. Références associées : PMID:14690523

• C'est un régulateur clé de l'horloge circadienne, phosphorylant et favorisant la dégradation des composants centraux de l'horloge BMAL1, CLOCK et PER2. Références associées : PMID:19946213, PMID:28903391

• La protéine est principalement cytoplasmique mais se localise également dans le noyau et la membrane cellulaire.

• La GSK3β est exprimée dans divers tissus, notamment les testicules, le thymus, la prostate, l'ovaire, et à des niveaux plus faibles dans le poumon, le cerveau et le rein ; elle colocalise avec PKR et TAU dans le cerveau atteint de la maladie d'Alzheimer.

• De plus, la GSK3β phosphoryle JUN (réduisant son affinité pour l'ADN), NFATC1 (favorisant l'export nucléaire) et régule l'apoptose, la signalisation de l'insuline et le développement neuronal. Références associées : PMID:1846781, PMID:9072970

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé est un phospho-peptide synthétique entourant la Ser9 de la GSK3β humaine. Pour le Western blot, il est conseillé d'inclure des inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse cellulaire et de vérifier le poids moléculaire à environ 47 kDa.
• Pour confirmer la spécificité phospho, envisagez de traiter les lysats cellulaires avec la λ‑phosphatase avant l'analyse ou de réaliser des tests de compétition par peptide avec le phospho‑peptide et le non‑phospho‑peptide.
• Pour l'ELISA, assurez-vous que l'antigène immobilisé sur la plaque préserve l'épitope phospho ; un tampon de revêtement doux et des conditions de blocage optimisées sont recommandés. Validez la linéarité du signal et le bruit de fond dans la matrice d'échantillon pertinente.

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