Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-FLT3-Y589/591 pour WB, ELISA - P36888

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de FLT3

• FLT3 (Fms-like tyrosine kinase 3), également désignée FLK2, STK1 et CD135, est une tyrosine-protéine kinase de type récepteur qui se lie au FLT3LG pour réguler la différenciation, la prolifération et la survie des cellules progénitrices hématopoïétiques et des cellules dendritiques.
• La signalisation en aval comprend la phosphorylation de SHC1 et AKT1, l'activation de MTOR, la cascade RAS/MAPK (MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1) et les protéines STAT5, bien que la FLT3 de type sauvage n'induit qu'une activation marginale de STAT5.
• FLT3 est localisée sur la membrane cellulaire et dans la lumière du réticulum endoplasmique.
• Son expression est détectée dans la moelle osseuse, les cellules souches hématopoïétiques, les cellules progénitrices myéloïdes et granulocytes/macrophages ; également dans le foie, le thymus, la rate, les ganglions lymphatiques, les reins et le pancréas, avec des niveaux élevés dans la leucémie à cellules T.
• Les mutations provoquant une activité constitutive de la kinase stimulent la prolifération cellulaire et la résistance à l'apoptose via de multiples voies, soulignant FLT3 comme un proto-oncogène et un variant clé de la maladie dans la leucémie myéloïde aiguë.
• En tant que glycoprotéine et phosphoprotéine, FLT3 subit un épissage alternatif et est soumise à la conjugaison d'ubiquitine ; elle joue également un rôle dans les interactions hôte-virus.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Étant donné que cet anticorps cible des sites de phosphorylation, utilisez des tampons de lyse complétés avec des inhibiteurs de phosphatase pour préserver l'épitope phospho pendant la préparation des échantillons pour le Western blot.
• Envisagez de stimuler les cellules exprimant FLT3 (par exemple, des lignées leucémiques) avec le ligand FLT3, ou de les traiter avec des inhibiteurs de kinase, pour confirmer la détection spécifique de la phosphorylation.
• Pour l'ELISA, le phosphopeptide immunogène peut servir de contrôle positif ; le revêtement de la plaque et les conditions de détection peuvent nécessiter une optimisation.
• Validez la spécificité de l'anticorps en comparant les signaux des lysats de type sauvage et traités à la phosphatase, ou en utilisant une mutagenèse dirigée sur Y589/Y591.

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