Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-FAK-Y925 pour WB, ELISA - Q05397

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de FAK

• La kinase d'adhésion focale 1 (FAK/PTK2) est une tyrosine kinase non réceptrice qui sert de régulateur critique de la migration cellulaire, de l'adhésion, de l'étalement et de la réorganisation du cytosquelette d'actine. Elle intègre la signalisation des intégrines, des récepteurs des facteurs de croissance et des récepteurs couplés aux protéines G.
• FAK subit une autophosphorylation sur Y397 lors de son activation, créant un site de liaison à haute affinité pour les kinases de la famille SRC. La phosphorylation ultérieure sur Y925 favorise le recrutement de GRB2, reliant à la cascade de signalisation MAP kinase/ERK et contribuant à la prolifération et à la survie cellulaires.
• La protéine se localise dynamiquement aux adhésions focales, à la membrane cellulaire, au cytoplasme périnucléaire, au cortex cellulaire, au centrosome et au noyau. Cette distribution permet un contrôle spatio-temporel de la transduction du signal et du remodelage du cytosquelette.
• FAK phosphorylate de multiples substrats, notamment NEDD9 (améliorant la signalisation médiée par les intégrines), BCAR1, GRB7 et SRC lui-même, modulant ainsi les voies en aval telles que les cascades PI3K/AKT et GTPase Rho. Références connexes : PMID:9360983
• L'isoforme 6 (FRNK), une variante d'épissage alternatif dépourvue du domaine kinase, agit comme un inhibiteur endogène en bloquant la phosphorylation de FAK et la signalisation nucléaire, atténuant la transcription dépendante du SRF.
• FAK est exprimé de manière ubiquitaire, avec une détection notable dans les lymphocytes B et T, les fibroblastes pulmonaires et les cellules épithéliales. Références connexes : PMID:31630787
• Les modifications post-traductionnelles, en particulier la phosphorylation aux résidus Y397, Y576, Y577, Y861 et Y925, régulent étroitement l'activité de FAK. La phosphorylation sur Y925 stimule spécifiquement l'interaction avec GRB2 et l'activation de la voie MAPK, en faisant un marqueur clé de la signalisation FAK dans les contextes de développement et de cancer.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique entourant la tyrosine 925 de FAK humain ; l'anticorps est censé reconnaître FAK uniquement lorsqu'il est phosphorylé sur ce site. Pour une spécificité optimale en WB, envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation.
• Poids moléculaire prédit : ~119 kDa. Une bande proche de cette taille dans les lysats cellulaires humains soutient la détection, mais des bandes supplémentaires provenant d'isoformes ou de modifications post-traductionnelles peuvent survenir, il faut donc comparer avec les contrôles FAK totaux.
• Pour ELISA, incluez un contrôle de peptide non phosphorylé pour confirmer la spécificité du phospho-site. Titrez la concentration de l'anticorps pour minimiser le bruit de fond et maximiser le rapport signal/bruit dans vos conditions d'essai spécifiques.
• Ce produit a une réactivité documentée avec des échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces est inconnue. Validez les performances dans tout système modèle non humain avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.

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