Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-ErbB4/HER4-Y1284 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q15303

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ErbB4/HER4

• La récepteur tyrosine-protéine kinase erbB-4 (ErbB4/HER4) est un membre de la famille des récepteurs du facteur de croissance épidermique (EGFR/ErbB), qui comprend également EGFR/ErbB1, ErbB2 et ErbB3.
• Agit comme un récepteur de surface cellulaire pour les néregulines (NRG1-4) et les membres de la famille de l'EGF (BTC, EREG, HBEGF), déclenchant la dimérisation et l'autophosphorylation pour initier des cascades de signalisation en aval.
• Régule des processus développementaux critiques, notamment la différenciation des muscles cardiaques, le développement du système nerveux central (migration des crêtes neurales et guidage axonal), ainsi que la différenciation et la lactation de la glande mammaire.
• L'épissage alternatif génère des isoformes fonctionnellement distinctes (par exemple, JM-A, JM-B, CYT-1, CYT-2) qui diffèrent par leurs capacités de signalisation, telles que l'activation de la voie PI3K/AKT et la translocation nucléaire.
• Le traitement protéolytique des isoformes JM-A libère des domaines intracellulaires solubles (4ICD) qui se transloquent vers le noyau pour réguler la transcription (par exemple, l'expression des protéines du lait médiée par STAT5A) ou vers les mitochondries pour promouvoir l'apoptose.
• La localisation subcellulaire s'étend à la membrane cellulaire, au noyau et à la mitochondrie, reflétant ses rôles de signalisation diversifiés.
• Exprimé aux niveaux les plus élevés dans le cerveau, le cœur et le rein, avec des niveaux plus faibles dans le thymus, les poumons, les glandes salivaires et le pancréas ; l'isoforme JM-B est principalement exprimée dans le cœur.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation des tyrosines, la glycosylation et l'ubiquitination, jouant des rôles clés dans la transduction du signal et la régulation à la baisse du récepteur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été produit contre un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus entourant Y1284 de l'ErbB4 humain ; vérifiez la spécificité en utilisant des témoins traités par phosphatase ou une compétition avec un peptide non phosphorylé dans votre système d'essai.
• Pour le Western blot (WB), prévoyez une bande majeure à environ 147 kDa ; optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps pour réduire la liaison non spécifique, en particulier dans les lysats tissulaires complexes.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), incluez des étapes de perméabilisation et validez la colocalisation du signal phospho avec des marqueurs membranaires ou nucléaires selon le contexte de l'isoforme.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser une paire de capture/détection avec un anticorps ErbB4 total pour normaliser le signal phospho et assurer la précision quantitative.
• Étant donné que la signalisation d'ErbB4 dépend du contexte, validez vos résultats dans des lignées cellulaires physiologiquement pertinentes (par exemple, MCF-7 pour le sein, H9c2 pour le cardiaque) avec une stimulation connue par NRG1.

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