Anticorps monoclonal de lapin anti-phospho-eNOS (S1177) pour WB, ELISA - P29474

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eNOS

• L'eNOS (oxyde nitrique synthase 3) catalyse la production d'oxyde nitrique (NO), qui agit comme un vasodilatateur par le biais de la relaxation des muscles lisses médiée par le GMPc. Références associées : PMID:1378832
• Le NO produit par l'eNOS est également essentiel pour l'angiogenèse médiée par le VEGF et l'activation plaquettaire, reliant la fonction endothéliale à la santé circulatoire.
• L'épissage alternatif génère une isoforme dominante négative qui peut s'hétérodimériser avec l'enzyme pleine longueur, réduisant potentiellement l'activité de l'eNOS.
• L'eNOS est localisé dans les cavéoles de la membrane plasmique, l'appareil de Golgi et le cytosquelette, permettant une signalisation compartimentée du NO.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation sur la Ser1177 (associée à l'activation), la myristoylation et la palmitoylation, qui régulent son ciblage subcellulaire et son activité.
• L'expression de l'eNOS est détectée dans les plaquettes, le placenta, le foie et les reins, les cellules endothéliales vasculaires étant un site principal de fonction.
• L'enzyme nécessite de multiples cofacteurs : hème, FAD, FMN, NADPH et zinc, et se lie à la calmoduline de manière dépendante du calcium pour son activation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant à la région Ser1177, ce qui suggère que l'anticorps reconnaît la forme phosphorylée de l'eNOS à ce site.
• Pour le Western blot, pensez à utiliser des inhibiteurs de phosphatase dans les tampons de lyse pour préserver la phosphorylation et valider la spécificité de la bande à l'aide de contrôles traités à la phosphatase.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation des conditions de revêtement et de détection ; envisagez de tester une gamme de dilutions d'anticorps et d'agents de blocage.
• Validez la spécificité dans des lysats cellulaires ou tissulaires humains pertinents, car la réactivité croisée avec d'autres espèces n'est pas indiquée ; incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.

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