Anticorps polyclonal Anti-Phospho-eNOS-S1177 pour WB, IHC-P, ELISA - P29474

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eNOS

• eNOS (oxyde nitrique synthase 3) est une enzyme exprimée constitutivement qui catalyse la production de monoxyde d'azote (NO), une molécule de signalisation essentielle impliquée dans la relaxation du muscle lisse vasculaire par une voie médiée par le cGMP et dans l'angiogenèse induite par le VEGF. Références associées : PMID:1378832
• Le NO produit par l'eNOS joue également un rôle dans l'activation plaquettaire et la régulation de la coagulation sanguine.
• L'enzyme se localise sur la membrane plasmique, les cavéoles, le cytoplasme, le cytosquelette et l'appareil de Golgi, ce qui reflète sa régulation subcellulaire dynamique.
• eNOS est exprimé dans les plaquettes, le placenta, le foie et les reins.
• L'épissage alternatif génère un isoforme dominant-négatif qui n'a pas d'activité eNOS et peut réguler négativement la fonction d'eNOS en formant des hétérodimères avec l'isoforme 1.
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent la phosphorylation sur la Ser1177 (l'épitope reconnu par cet anticorps), ainsi que la myristoylation et la palmitoylation pour l'ancrage membranaire.
• L'activité de l'eNOS dépend de cofacteurs tels que l'hème, le FAD, le FMN, le NADP, la calmoduline et de métaux comme le calcium et le zinc.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting, incluez des contrôles appropriés (par exemple, cellules endothéliales non stimulées versus stimulées) et des inhibiteurs de phosphatase pour confirmer la phospho-spécificité et empêcher la déphosphorylation.
• En immunohistochimie (IHC-P), validez l'anticorps sur des coupes incluses en paraffine en utilisant une récupération d'antigène et réalisez une coloration parallèle avec un anticorps anti-eNOS indépendant de la phosphorylation pour évaluer la spécificité.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour capturer ou détecter l'eNOS phosphorylé (Ser1177) dans des lysats cellulaires ou des préparations de protéines recombinantes ; envisagez d'utiliser un anticorps anti-eNOS total pour la normalisation.
• Le poids moléculaire prédit de l'eNOS est d'environ 133 kDa ; utilisez des marqueurs de poids moléculaire et des pourcentages de gel appropriés pour une résolution claire.
• Une réactivité croisée a été rapportée pour l'homme et la souris ; si vous utilisez d'autres espèces, réalisez un alignement de séquence pour évaluer la conservation de l'épitope et validez empiriquement la réactivité.

CamelBio : Votre pont d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio accompagne les fabricants de diagnostics et les équipes de recherche en fournissant un point d'accès unique aux matières premières pour l'IVD, incluant des paires d'anticorps validées, des anticorps monoclonaux et polyclonaux optimisés et des réactifs auxiliaires en vrac. Cet anticorps anti-eNOS phosphorylé (Ser1177) est idéal pour les études sur la biologie vasculaire et la signalisation endothéliale, et CamelBio peut aider à l'approvisionnement de cibles rares et à l'obtention de réactifs personnalisés pour rationaliser votre projet, du concept à la clinique.