Anticorps polyclonal anti-Phospho-eIF4EBP1-T36 pour WB, ELISA - Q13541

Caractéristiques et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eIF4EBP1

• La protéine 1 de liaison au facteur d'initiation de la traduction eucaryote 4E (eIF4EBP1), également connue sous le nom de PHAS-I, est un répresseur clé de l'initiation de la traduction dépendante de la coiffe.
• Dans son état hypophosphorylé, l'eIF4EBP1 se lie étroitement à eIF4E, empêchant la formation du complexe eIF4F et inhibant la traduction.
• La phosphorylation sur de multiples sites, dont Thr36, conduit à une eIF4EBP1 hyperphosphorylée qui se dissocie d'eIF4E, permettant ainsi à la traduction de se poursuivre.
• L'eIF4EBP1 intègre les signaux de divers facteurs de croissance et hormones via les voies MAP kinase et mTORC1, régulant la synthèse protéique en réponse à des stimuli extracellulaires.
• Au niveau subcellulaire, l'eIF4EBP1 se trouve à la fois dans le cytoplasme et le noyau, faisant la navette entre les compartiments pour réguler la disponibilité d'eIF4E.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, qui modulent son activité et sa stabilité.
• En tant que nœud critique dans l'axe de signalisation PI3K/AKT/mTOR, l'eIF4EBP1 est impliquée dans la croissance cellulaire, la prolifération et le métabolisme, ce qui en fait un biomarqueur pour le cancer et les troubles métaboliques.

Guide expérimental et conseils techniques

• Étant donné que l'immunogène est un phosphopeptide spécifique à Thr36 de l'eIF4EBP1, vérifiez la liaison dépendante de la phosphorylation en traitant les échantillons avec une phosphatase ou en utilisant une compétition avec un peptide non phosphorylé.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 13-15 kDa peut être détectée ; notez que la phosphorylation induit souvent des bandes multiples en raison des différents états de phosphorylation.
• Une réactivité croisée avec l'eIF4EBP1 de souris et de rat est indiquée ; cependant, confirmez l'homologie de séquence autour de Thr36 et validez dans les lignées cellulaires ou tissus pertinents.
• Envisagez d'inclure des contrôles positifs appropriés, tels que des lysats de cellules stimulées par l'insuline ou le sérum, pour observer les signaux dépendants de la phosphorylation.
• Pour l'ELISA, l'immobilisation du phosphopeptide et la détection avec un anticorps secondaire anti-lapin peuvent être optimisées ; assurez-vous que les étapes de blocage réduisent la liaison non spécifique.
• Évitez les cycles de congélation-décongélation et stockez l'anticorps de manière appropriée, comme indiqué par la condition d'expédition en sac de glace.

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