Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-eIF4E-S209 pour WB, ELISA - P06730

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'eIF4E

• Le facteur d'initiation de la traduction eucaryote 4E (eIF4E) est une protéine de liaison à la coiffe de l'ARNm de 25 kDa et la sous-unité limitante du complexe eIF4F, qui reconnaît la coiffe 7-méthylguanosine (m7G) et recrute les ribosomes pour l'initiation de la traduction dépendante de la coiffe (PubMed:16271312, PubMed:22578813). Références associées : PMID:16271312 PMID:22578813
• Dans le noyau, eIF4E favorise l'export d'un sous-ensemble d'ARNm, y compris CCND1, NOS2/iNOS et MDM2, via une voie dépendante de XPO1, influençant ainsi la progression du cycle cellulaire et l'apoptose (PubMed:23471078, PubMed:22684010). Références associées : PMID:23471078 PMID:22684010
• eIF4E régule également l'épissage de l'ARNm, le traitement de l'extrémité 3' et le coiffage à l'état stationnaire en contrôlant l'export nucléaire et la traduction des ARNm de la machinerie d'épissage et de coiffage (PubMed:11606200). Références associées : PMID:11606200
• Avec EIF4G1, eIF4E antagonise le balayage et est requis pour la traduction médiée par l'élément TISU, un mécanisme d'initiation dépendant de la coiffe mais indépendant du balayage (PubMed:29987188). Références associées : PMID:29987188
• Dans le cytoplasme, eIF4E est un composant des corps P et des granules de stress, où il participe à la répression traductionnelle et au stockage des ARNm, régulant ainsi la stabilité de l'ARNm (PubMed:24335285). Références associées : PMID:24335285
• eIF4E est soumis à une phosphorylation sur plusieurs sites, y compris S209, ce qui module son affinité de liaison à la coiffe et son activité traductionnelle ; une acétylation a également été rapportée.
• La protéine est associée au trouble du spectre autistique (AUTS19) et joue un rôle dans les interactions hôte-virus, soulignant son importance biologique étendue.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été produit contre un peptide phospho-synthétique correspondant aux résidus entourant S209 ; il est recommandé pour détecter eIF4E phosphorylé sur S209, et non eIF4E total.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser du BSA plutôt que du lait pour le blocage afin de réduire le bruit de fond dû à l'interférence avec l'épitope phospho. Un contrôle positif tel qu'un lysat de cellules stimulées par du sérum peut être utilisé.
• Le traitement des lysats cellulaires avec de la phosphatase lambda peut servir de contrôle négatif pour confirmer le signal dépendant de la phosphorylation.
• L'anticorps a été validé pour l'ELISA ; pour les dosages quantitatifs, l'utilisation conjointe avec un anticorps anti-eIF4E total peut fournir une référence de normalisation.

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