Anticorps Polyclonal Anti-Phospho-EIF4B-S422 pour WB, ELISA - P23588

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'EIF4B

• L'EIF4B est un facteur d'initiation de la traduction eucaryote requis pour la liaison de l'ARNm aux ribosomes.
• Il fonctionne en étroite association avec l'EIF4F et l'EIF4A, se liant près de la coiffe 5'-terminale de l'ARNm en présence d'EIF4F et d'ATP.
• L'EIF4B favorise l'activité ATPase et l'activité de déroulement de l'ARN dépendante de l'ATP de l'EIF4A et de l'EIF4F.
• Le gène EIF4B subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes.
• La protéine est sujette à des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination (conjugaison Ubl).
• Le séquençage direct des protéines et l'identification par protéomique confirment son expression dans les cellules humaines.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Cet anticorps a été élevé contre un peptide phospho-synthétique représentant le site de phosphorylation en S422 ; il devrait détecter spécifiquement l'EIF4B endogène uniquement lorsqu'elle est phosphorylée sur ce résidu.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver l'état de phosphorylation. Validez la spécificité en traitant les lysats cellulaires avec la λ‑phosphatase ou par compétition avec le peptide non phosphorylé.
• Dans l'ELISA, le peptide phosphorylé peut servir d'antigène de revêtement ; incluez des témoins appropriés utilisant le peptide non phosphorylé pour confirmer la dépendance à la phosphorylation.
• Optimisez la dilution de l'anticorps et les conditions d'incubation dans le système d'échantillon pertinent ; la réactivité croisée n'a été testée que pour des échantillons humains.

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