Anticorps Monoclonal Anti-Phospho-eIF2α-S51 pour WB, ELISA - P05198

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'eIF2α

• Le facteur d'initiation de la traduction eucaryote 2 sous-unité 1 (eIF2α) est un composant central du complexe hétérotrimérique eIF2, également connu sous le nom d'eIF-2-alpha, eIF-2A ou eIF2-alpha. Avec eIF2β et eIF2γ, il orchestre les premières étapes de la synthèse des protéines dépendante de la coiffe (cap-dependent). Références associées : PMID:16289705
• Il forme un complexe ternaire avec le GTP et le méthionyl-tRNA initiateur, qui s'associe ensuite à la sous-unité ribosomique 40S, facilitant le recrutement de l'ARNm pour former le complexe de pré-initiation 43S. L'hydrolyse ultérieure du GTP et la libération d'eIF2-GDP permettent la formation du complexe 80S. Références associées : PMID:16289705
• La phosphorylation sur la sérine 51 (S51) par les kinases activées par le stress (HRI, PKR, PERK, GCN2) convertit l'eIF2α en un inhibiteur global de la traduction, un événement central de la réponse intégrée au stress (ISR). Cela atténue la synthèse protéique globale tout en augmentant l'expression sélective d'ARNm tels que ATF4 et QRICH1, permettant l'adaptation cellulaire au stress. Références associées : PMID:19131336 PMID:33384352
• Au-delà du contrôle de la traduction, l'eIF2α phosphorylé favorise la mitophagie indépendante de PRKN en se relocalisant vers la membrane externe des mitochondries lors de dommages mitochondriaux, fournissant un lien direct entre la reprogrammation translationnelle et le contrôle de qualité des organites. Références associées : PMID:38340717
• L'eIF2α est principalement cytoplasmique et peut se concentrer dans les granules de stress dans des conditions défavorables. Il se localise également à la surface des mitochondries suite à la phosphorylation induite par le stress et a été détecté dans le cytosol.
• Cette protéine fait l'objet de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l'acétylation, qui ajustent finement son activité, son ciblage sous-cellulaire et ses interactions.
• En tant que protéine hautement conservée, l'eIF2α est exprimé dans les tissus humains, de souris et de rat, soulignant son rôle essentiel dans le contrôle de la traduction et la gestion du stress cellulaire.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique couvrant le résidu S51 de l'eIF2α humain (NP_004085.1) ; par conséquent, l'anticorps est conçu pour reconnaître la forme phosphorylée. L'eIF2α non phosphorylé pourrait ne pas être détecté.
• Pour le western blotting, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et d'incubation pour préserver le signal de phosphorylation S51. Vérifiez la spécificité de l'anticorps en traitant les échantillons avec la λ-phosphatase ou la phosphatase intestinale de veau avant l'analyse.
• Car la phosphorylation de l'eIF2α est souvent rapide et transitoire dans des conditions de stress, optimisez le timing de la préparation des échantillons et les protocoles d'induction du stress (par exemple, privation sérique, stress du réticulum endoplasmique ou privation d'acides aminés) dans le système cellulaire ou tissulaire pertinent.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser une paire de capture/détection qui différencie l'eIF2α total et l'eIF2α phosphorylé si une quantification simultanée des deux formes est requise ; validez le test avec des témoins positifs et négatifs appropriés.

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