Anticorps polyclonal de lapin Anti-Phospho-EGFR-Y1173 pour WB, ELISA - P00533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EGFR

• Le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) est une tyrosine kinase réceptrice qui se lie aux ligands de la famille EGF et active de multiples cascades de signalisation, notamment les modules RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC et STAT, pour réguler des réponses cellulaires comme la prolifération, la migration et la survie. Références associées : PMID:27153536, PMID:10805725, PMID:2790960
• Après liaison du ligand, l'EGFR subit une homo- ou hétérodimérisation et une autophosphorylation sur des résidus tyrosines cytoplasmiques clés, dont Y1173, créant des sites d'ancrage pour des protéines adaptatrices comme GRB2, qui propagent la signalisation en aval. Références associées : PMID:12297049, PMID:15611079
• L'EGFR peut également phosphoryler directement des substrats comme RGS16 et MUC1, et participe à la signalisation NF-kappa-B, le reliant aux voies des récepteurs couplés aux protéines G et à l'adhésion cellulaire. Références associées : PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:11116146
• L'isoforme 2 de l'EGFR peut fonctionner comme antagoniste de l'action de l'EGF et est notamment exprimée dans les cancers ovariens.
• L'EGFR se localise principalement à la membrane cellulaire, mais également au réticulum endoplasmique, à l'appareil de Golgi, au noyau, aux endosomes, et peut être sécrété, ce qui reflète son trafic dynamique et ses rôles de signalisation.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation (sur tyrosine, sérine, thréonine), la glycosylation, l'ubiquitination et la palmitoylation, qui régulent son activité, sa stabilité et ses réseaux d'interaction.
• Exprimé de manière ubiquitaire, l'EGFR joue un rôle dans le développement, la mémoire, l'apprentissage et la signalisation de la douleur, et sa dérégulation est impliquée dans divers cancers.
• L'EGFR sert également de récepteur cellulaire hôte pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC), facilitant l'internalisation virale dans les hépatocytes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique spécifique de Y1173 de l'EGFR humain. Pour le Western blot, il est recommandé d'utiliser des tampons de lyse phospho-spécifiques et des inhibiteurs de phosphatases pour préserver l'état de phosphorylation pendant la préparation des échantillons.
• Comme l'EGFR est fortement phosphorylé après stimulation par le ligand, un traitement des cellules par l'EGF avant récolte peut améliorer la détection du signal en WB ; inversement, une privation de sérum et/ou un traitement à la phosphatase peuvent être utilisés pour vérifier la phospho-spécificité.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser l'anticorps en format sandwich avec un anticorps de capture anti-EGFR total pour quantifier les niveaux d'EGFR phosphorylé dans des lysats cellulaires ou des extraits tissulaires.
• Une désorption croisée avec le peptide non phosphorylé peut être réalisée pour confirmer la phospho-spécificité à la fois en WB et en ELISA.

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