Anticorps polyclonal de lapin anti-phospho-DNMT1 (S714) pour WB, IF/ICC, ELISA - P26358

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la DNMT1

• ADN méthyltransférase qui méthyle les résidus CpG, avec une préférence pour l'ADN hémiméthylé. Références associées : PMID:17200670, PMID:18754681, PMID:21745816, PMID:26070743
• S'associe aux sites de réplication de l'ADN pendant la phase S et à la chromatine pendant les phases G2 et M pour maintenir les modèles de méthylation essentiels à l'héritage épigénétique. Références associées : PMID:17200670, PMID:21745816
• Responsable de la préservation des modèles de méthylation de l'ADN établis au cours du développement. Références associées : PMID:21745816
• La méthylation de l'ADN est coordonnée avec les modifications des histones ; elle médie également la répression transcriptionnelle par liaison directe à HDAC2. Références associées : PMID:16357870, PMID:10888872
• En association avec DNMT3B et CTCFL/BORIS, active l'expression du gène BAG1 en modulant la diméthylation de l'histone H3 aux niveaux H3K4 et H3K9. Références associées : PMID:18413740
• Forme un complexe corépresseur requis pour l'hyperméthylation du promoteur médiée par KRAS activé et le silençage transcriptionnel des gènes suppresseurs de tumeurs dans les cellules cancéreuses colorectales ; maintient également un état de répression transcriptionnelle dans les cellules souches embryonnaires. Références associées : PMID:24623306
• Se localise dans le noyau et les chromosomes.
• Subit des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation sur la Ser714 et d'autres résidus, l'acétylation et la méthylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phospho-peptide synthétique couvrant la Ser714 de la DNMT1 humaine ; confirmez la spécificité de la phosphorylation par un traitement à la phosphatase ou des tests de compétition peptidique.
• Pour le Western blot, la DNMT1 migre à environ 183 kDa ; optimisez les conditions de transfert pour la détection de poids moléculaires élevés.
• En immunofluorescence/ICC, attendez-vous à un marquage nucléaire ; effectuez un co-immunomarquage avec un anticorps total anti-DNMT1 pour différencier les signaux spécifiques à la phosphorylation.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser des peptides phosphorylés et non phosphorylés comme antigènes de revêtement pour vérifier la spécificité de la liaison.

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