Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-Chk2-T68 pour WB, ELISA - O96017

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Chk2

• La sérine/thréonine-protéine kinase Chk2 (CHEK2, homologue de CDS1, RAD53) joue un rôle critique dans l'arrêt du cycle cellulaire médié par les points de contrôle, la réparation de l'ADN et l'apoptose en réponse aux cassures double-brin de l'ADN.
• Agit comme un suppresseur de tumeur ; régule également négativement la progression du cycle cellulaire lors de cycles non perturbés et peut contribuer à l'instabilité chromosomique en son absence.
• Suite à son activation, phosphoryle de nombreux effecteurs de préférence sur la séquence consensus [L-X-R-X-X-S/T].
  Références connexes : PMID:37943659
• Régule l'arrêt du cycle cellulaire par phosphorylation et inhibition des phosphatases CDC25A, CDC25B et CDC25C, entraînant une phosphorylation tyrosine inhibitrice des complexes CDK-cycline.
• Promeut la réparation de l'ADN par phosphorylation de BRCA2 (améliorant l'association chromatinienne de RAD51) et en stimulant la transcription des gènes de réparation de l'ADN via FOXM1.
• Mediate l'apoptose par phosphorylation de p53/TP53 sur Ser-20, MDM4 et PML, ainsi que par la transcription dépendante d'E2F1 de gènes pro-apoptotiques.
• Sous stress oxydatif, phosphoryle TRIM32 sur Ser-55 pour promouvoir l'ubiquitination d'ATG7 et l'assemblage de l'autophagie.
  Références connexes : PMID:37943659
• Promeut l'association CCAR2-SIRT1 et est nécessaire pour l'inhibition de SIRT1 médiée par CCAR2.
  Références connexes : PMID:25361978
• Se localise principalement dans le noyau (nucléoplasme, corps PML) ; fortement exprimé dans les testicules, la rate, le côlon et les leucocytes du sang périphérique, avec une expression plus faible dans d'autres tissus.
• Contient des domaines kinase, de liaison à l'ATP et de liaison aux nucléotides ; classé comme une phosphoprotéine avec des rôles dans la mitose, la régulation de la transcription et l'interaction hôte-virus.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour du T68, suggérant une spécificité pour la forme phosphorylée ; utilisez des inhibiteurs de phosphatases appropriés lors de la préparation des échantillons pour préserver les signaux phospho.
• Pour le Western blot, envisagez de stimuler les cellules avec des agents endommageant l'ADN (par exemple, étoposide, irradiation) pour induire la phosphorylation de Chk2 avant la préparation du lysat.
• Validez l'anticorps sur des échantillons humains ; des bandes de fond peuvent apparaître, et il est conseillé d'optimiser les conditions de chargement et de détection.
• Pour l'ELISA, le peptide phosphorylé peut servir d'antigène de revêtement pour confirmer la spécificité ; des témoins négatifs utilisant un peptide non phosphorylé sont recommandés.
• Une bande attendue près de 61 kDa devrait être observée en WB ; des bandes supplémentaires peuvent refléter des variants d'épissage ou des modifications post-traductionnelles.

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