Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-Chk1-S345 pour WB et ELISA - O14757

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Chk1

• Chk1 est une sérine/thréonine-protéine kinase essentielle pour le point de contrôle des dommages à l'ADN, nécessaire à l'arrêt du cycle cellulaire et à l'activation de la réparation de l'ADN en réponse à des dommages ou à de l'ADN non répliqué. Références associées : PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Elle reconnaît le motif consensus du substrat [R-X-X-S/T] et phosphoryle CDC25A, CDC25B et CDC25C, conduisant à leur inhibition via la liaison aux 14-3-3 et la dégradation protéasomale, bloquant ainsi l'activité CDK-cycline et arrêtant la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• Chk1 subit une phosphorylation sur plusieurs résidus, Ser-345 étant un site clé pour son activation en réponse aux dommages à l'ADN, médiant son activité kinase et ses fonctions de point de contrôle.
• Chk1 phosphoryle RAD51 sur Thr-309 pour promouvoir la réparation par recombination homologue. Références associées : PMID:15665856
• Elle phosphoryle TP53 sur plusieurs sites, améliorant sa stabilisation et son activité transcriptionnelle pour induire l'arrêt du cycle cellulaire. Références associées : PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Chk1 se localise dans le noyau, les chromosomes et les centrosomes, reflétant ses rôles dans les processus associés à la chromatine et la régulation mitotique.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le thymus, le testicule, l'intestin grêle et le côlon.
• L'épissage alternatif du gène CHEK1 produit un isoforme répresseur endogène qui facilite la transition de la phase S à la phase G2/M.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène a été conçu en utilisant un phosphopeptide synthétique correspondant au résidu Ser-345 phosphorylé de la Chk1 humaine. Cela garantit la spécificité pour la forme activée et phosphorylée de la kinase.
• Pour le Western blot, envisagez d'inclure des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation. Validez la spécificité phospho en traitant les échantillons avec de la phosphatase lambda et en observant la perte du signal.
• La réactivité de l'anticorps a été testée avec des échantillons humains, de souris et de rat ; la réactivité croisée avec d'autres espèces doit être validée individuellement.
• En ELISA, l'anticorps peut être adapté pour détecter la phospho-Chk1 dans des lysats cellulaires ou des tests basés sur des peptides. Optimisez les conditions de revêtement et de détection pour votre configuration spécifique.
• Étant donné le rôle critique de Chk1 dans la réponse aux dommages à l'ADN, cet anticorps est un outil utile pour étudier la signalisation des points de contrôle, la régulation du cycle cellulaire et la biologie du cancer.

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