Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Chk1 (S317) pour WB, ELISA - O14757

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Chk1

• Sérine/thréonine-protéine kinase (gène CHEK1) qui existe sous deux isoformes : la kinase complète (isoforme 1) et une isoforme répresseur endogène qui antagonise CHK1 pour promouvoir la transition S vers G2/M.
• Nécessaire pour l'arrêt du cycle cellulaire médié par les points de contrôle et l'activation de la réparation de l'ADN en réponse à des dommages à l'ADN ou à un ADN non répliqué. Références associées : PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Phosphoryle les phosphatases de la famille CDC25 (CDC25A, CDC25B, CDC25C) pour créer des sites de liaison 14-3-3 et inhiber leur activité, empêchant ainsi l'activation des CDK-cyclines et bloquant la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511
• Marque CDC25A pour la dégradation par le protéasome en phosphorylant plusieurs résidus sérine (Ser-76, Ser-124, Ser-178, Ser-279, Ser-293), la Ser-76 amorçant la polyubiquitination médiée par NEK11. Références associées : PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:19734889 PMID:20090422 PMID:9278511
• Phosphoryle RAD51 sur Thr-309, favorisant sa libération de BRCA2 et améliorant l'association à la chromatine pour faciliter la réparation par recombinaison homologue. Références associées : PMID:15665856
• Phosphoryle TP53 sur plusieurs sites C-terminaux, favorisant l'acétylation, l'activation transcriptionnelle et l'arrêt du cycle cellulaire. Références associées : PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Phosphoryle en outre FANCE (réparation des pontages ADN), TLK1 (assemblage de la chromatine) et d'autres substrats pour coordonner le maintien du génome. Références associées : PMID:17296736 PMID:12660173 PMID:12955071
• Se localise dans le noyau, les chromosomes, le cytoplasme et le centrosome ; il est exprimé de manière ubiquitaire avec les niveaux les plus élevés dans le thymus, le testicule, l'intestin grêle et le côlon.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour confirmer la phospho-spécificité, traitez les échantillons avec de la lambda phosphatase ou incluez un contrôle de blocage par peptide non phosphorylé.
• Pour le Western blot, stimulez les cellules avec des agents endommageant l'ADN (par exemple étoposide, UV ou hydroxyurée) pour induire la phosphorylation de Chk1 sur S317 et améliorer la détection du signal.
• Validez les performances de l'anticorps dans les lignées cellulaires humaines et les systèmes d'essai concernés, la réactivité croisée avec d'autres espèces n'ayant pas été documentée.
• Pour les applications ELISA, utilisez des contrôles positifs et négatifs appropriés pour garantir la spécificité de l'épitope phosphorylé.
• Envisagez d'optimiser la dilution de l'anticorps et les conditions d'incubation pour votre dispositif expérimental spécifique.

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