Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Chk1-S296 pour WB, ELISA - O14757

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CHK1

• CHK1 (Checkpoint kinase-1) est une sérine/thréonine-protéine kinase codée par le gène CHEK1, existant sous plusieurs isoformes par épissage alternatif.
• Elle est essentielle pour l'arrêt du cycle cellulaire médié par les points de contrôle et l'activation de la réparation de l'ADN en réponse à des dommages à l'ADN ou à de l'ADN non répliqué, préservant ainsi l'intégrité génomique. Références associées : PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• CHK1 phosphoryle les phosphatases de la famille CDC25 (CDC25A, B, C) conduisant à leur inhibition et à l'inactivation subséquente des complexes CDK-cycline, ce qui bloque la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511
• Elle phosphoryle directement TP53 sur plusieurs sites C-terminaux, favorisant l'activation de TP53, l'arrêt du cycle cellulaire et la suppression de la prolifération cellulaire. Références associées : PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• CHK1 module la réparation par recombination homologue en phosphorylant RAD51 sur Thr-309, améliorant l'association de RAD51 à la chromatine et la réparation de l'ADN. Références associées : PMID:15665856
• Les substrats supplémentaires incluent FANCE (réparation des pontages), TLK1 (assemblage de la chromatine), SPRTN (recrutement chromatinien), PABIR1/FAM122A (point de contrôle G2/M) et les histones (régulation transcriptionnelle), soulignant son rôle multifacette dans la maintenance du génome. Références associées : PMID:17296736, PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:31316063, PMID:33108758, PMID:17380128
• Au niveau subcellulaire, CHK1 se localise dans le noyau, les chromosomes, le cytoplasme et le centrosome, ce qui est cohérent avec ses fonctions diverses dans la signalisation des dommages à l'ADN et le contrôle du cycle cellulaire.
• CHK1 est exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le thymus, les testicules, l'intestin grêle et le côlon, et son activité est étroitement régulée par phosphorylation sur de multiples résidus.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western Blot, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour maintenir la phosphorylation et validez la taille de la bande près de 54 kDa.
• Testez l'anticorps sur des lysats de cellules traitées avec des agents endommageant l'ADN (par exemple, étoposide, hydroxyurée) pour confirmer la spécificité phospho sur Ser296.
• Cet anticorps est validé pour la Chk1 humaine ; la réactivité croisée avec d'autres espèces doit être évaluée individuellement.
• Pour l'ELISA, envisagez de revêtir à la fois des peptides phosphorylés et non phosphorylés pour démontrer la sélectivité phospho.

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