Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Chk1-S280 pour WB, ELISA - O14757

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Chk1

• La sérine/thréonine-protéine kinase Chk1 (CHEK1), également connue sous le nom de checkpoint kinase-1, est un régulateur clé des points de contrôle du cycle cellulaire et de la réponse aux dommages à l'ADN (PubMed:11535615, PubMed:12399544, PubMed:12446774). Références associées : PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Fonctionne en phosphorylant les phosphatases de la famille CDC25 (CDC25A, CDC25B, CDC25C) sur des résidus sérine spécifiques, conduisant à leur inhibition via la liaison aux protéines 14-3-3 ou la dégradation protéasomale, empêchant ainsi l'activation des CDK et arrêtant la progression du cycle cellulaire (PubMed:9278511, PubMed:12676583, PubMed:12676925, PubMed:12759351). Références associées : PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• Phosphoryle TP53 sur plusieurs sites C-terminaux, favorisant l'acétylation et l'activation de TP53, ce qui contribue à l'arrêt du cycle cellulaire et à l'apoptose (PubMed:10673501, PubMed:15659650, PubMed:16511572). Références associées : PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Impliquée dans la réparation de l'ADN par recombination homologue via la phosphorylation de RAD51 sur Thr-309, facilitant le chargement de RAD51 sur la chromatine, et en régulant FANCE dans la réparation des pontages interbrins (PubMed:15665856, PubMed:17296736). Références associées : PMID:15665856, PMID:17296736
• Se localise principalement dans le noyau et sur les chromosomes, mais se trouve également dans le cytoplasme et au niveau des centrosomes, reflétant ses rôles multiples dans le maintien du génome.
• Exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le thymus, les testicules, l'intestin grêle et le côlon.
• Contient un domaine kinase liant l'ATP et est régulée par phosphorylation ; classée parmi les sérine/thréonine-protéines kinases et impliquée dans les voies de dommages et de réparation de l'ADN.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de S280 de la Chk1 humaine ; confirmer la spécificité de l'anticorps par un traitement à la phosphatase ou une inhibition compétitive avec un peptide non phosphorylé.
• Cet anticorps monoclonal de lapin est validé pour le WB et l'ELISA ; envisagez d'utiliser des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lignées cellulaires humaines traitées avec des agents génotoxiques).
• Pour le WB, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans le tampon de lyse pour préserver la phosphorylation ; validez dans le système d'échantillon pertinent.
• Le poids protéique prédit est de 54 kDa ; optimisez le pourcentage de gel et les conditions de transfert en conséquence.

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