Anticorps monoclonal anti-Phospho-Chk1 (S280) pour WB, ELISA - O14757

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la sérine/thréonine-protéine kinase Chk1

• La sérine/thréonine-protéine kinase Chk1 (CHEK1) est une kinase essentielle pour l'arrêt du cycle cellulaire médié par les points de contrôle et la réparation de l'ADN. Un isoforme issu d'un épissage alternatif (isoforme 2) agit comme un répresseur endogène de l'isoforme 1, antagonisant sa fonction.
• Nécessaire pour la réponse aux dommages à l'ADN : reconnaît la séquence consensus du substrat [R-X-X-S/T] et phosphoryle CDC25A, CDC25B et CDC25C, créant des sites de liaison pour 14-3-3 qui inhibent ces phosphatases et/ou favorisent la dégradation de CDC25A, entraînant une phosphorylation inhibitrice sur tyrosine des complexes CDK-cycline et un arrêt du cycle cellulaire. Références associées : PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511
• Phosphoryle RAD51 sur la Thr-309, favorisant sa libération de BRCA2 et augmentant son association à la chromatine, facilitant ainsi la réparation de l'ADN par recombination homologue. Références associées : PMID:15665856
• Phosphoryle plusieurs sites C-terminaux de TP53, améliorant son acétylation et son activation pour promouvoir l'arrêt du cycle cellulaire et supprimer la prolifération. Références associées : PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Phosphoryle également d'autres substrats, notamment FANCE (réparation des pontages de l'ADN), TLK1 (assemblage de la chromatine), l'histone H3.1 sur la Thr-11 (silencing génique épigénétique), RB1 (favorisant l'interaction avec E2F), SPRTN (recrutement chromatinien) et PABIR1/FAM122A (régulation du point de contrôle G2/M). Références associées : PMID:17296736 PMID:12660173 PMID:12955071 PMID:17380128 PMID:31316063 PMID:33108758
• La localisation subcellulaire comprend le noyau, les chromosomes, le cytoplasme et les centrosomes, ce qui correspond à ses rôles dans la signalisation des points de contrôle, la réparation de l'ADN et la régulation du cycle cellulaire.
• Exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le thymus, les testicules, l'intestin grêle et le côlon.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide phospho entourant la Ser280 de la Chk1 humaine. L'anticorps est conçu pour reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée. Validez la spécificité en comparant les signaux dans des échantillons traités par phosphatase vs non traités, ou en utilisant un peptide de blocage non phosphorylé.
• Pour le Western blot, il est recommandé d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases appropriés lors de la préparation des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation. Une bande proche de 54 kDa est attendue pour Chk1.
• En ELISA, envisagez d'utiliser un peptide phospho immobilisé sur plaque et un contrôle avec un peptide non phospho pour confirmer la spécificité phospho.
• La phosphorylation de Chk1 sur Ser280 est induite par des dommages à l'ADN. Stimuler les cellules avec des agents endommageant l'ADN (par exemple, UV, hydroxyurée) peut améliorer la détection dans les lignées cellulaires pertinentes.

CamelBio : Votre pont d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio est un partenaire d'approvisionnement tout-en-un dédié aux matières premières pour IVD, accompagnant les fabricants de diagnostics, les laboratoires et les instituts de recherche du concept à la clinique. Cet anticorps anti-Phospho-Chk1 (S280) répond à des besoins clés dans la recherche sur le cycle cellulaire et les dommages à l'ADN, et CamelBio propose une gamme complète de paires d'anticorps validées, d'anticorps monoclonaux/polyclonaux optimisés, de réactifs auxiliaires en vrac et d'approvisionnement en matières premières pour cibles rares. Contactez-nous pour rationaliser vos achats et accélérer le développement de vos tests de nouvelle génération.