Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-CDK2-T160 pour WB, IHC-P, ELISA - P24941

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CDK2

• CDK2 (Cyclin-dependent kinase 2) est une sérine/thréonine-protéine kinase qui joue un rôle central dans la régulation du cycle cellulaire, en particulier lors de la transition G1-S et de la progression de la phase S. Il phosphoryle des substrats critiques tels que RB1, p53/TP53, NPM1 et BRCA2 pour promouvoir la synthèse d'ADN, la duplication du centrosome et les programmes transcriptionnels. CDK2 est essentiel pour la méiose mais dispensable pour la mitose. Références associées : PMID:10499802 PMID:10884347 PMID:10995386 PMID:11051553

• L'activité kinase de CDK2 est étroitement contrôlée par la liaison aux cyclines et la phosphorylation. Les complexes Cycline E/CDK2 pilotent la transition G1-S, tandis que les complexes Cycline A/CDK2 propulsent la progression S-G2. L'activation complète nécessite une phosphorylation au niveau du résidu Thr-160 dans la boucle T par le complexe CDK-activating kinase (CAK). Références associées : PMID:18372919 PMID:19238148 PMID:19561645

• CDK2 se localise dans plusieurs compartiments sous-cellulaires, notamment le noyau, le centrosome, le corps de Cajal, le cytoplasme, le cytosquelette et l'endosome, ce qui reflète ses diverses fonctions dans la coordination du cycle cellulaire, la réparation de l'ADN et la signalisation.

• CDK2 participe aux voies de réponse et de réparation des dommages à l'ADN. Il phosphoryle BRCA2 pour réguler la réparation par recombinaison homologue et phosphoryle NBN pour influencer le maintien des télomères, contribuant ainsi à la stabilité du génome. Références associées : PMID:15800615 PMID:20195506 PMID:21319273 PMID:28216226

• CDK2 phosphoryle la méthyltransférase d'histone EZH2, favorisant le maintien des marques épigénétiques H3K27me3 et le silence génique. Cela souligne le rôle de CDK2 dans la régulation épigénétique. Références associées : PMID:20935635

• Les modifications post-traductionnelles de CDK2, telles que la phosphorylation, l'acétylation et la S-nitrosylation, modulent son activité et sa stabilité. CDK2 est un membre de la superfamille des protéines kinases, comportant des domaines de liaison à l'ATP et aux métaux. Références associées : PMID:20079829

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Cet anticorps reconnaît spécifiquement le CDK2 phosphorylé en Thr-160. Pour préserver la phosphorylation lors de la préparation des échantillons, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et évitez les incubations prolongées à température ambiante.
• Pour le Western blotting, des bandes sont attendues à environ 30 kDa et 34 kDa (correspondant aux isoformes de CDK2 ou aux décalages induits par la phosphorylation). Utilisez des lysats traités à la λ-phosphatase comme témoin négatif et des extraits de cellules enrichies en phase S comme témoin positif.
• En immunohistochimie (IHC-P), les méthodes de récupération d'antigène doivent être optimisées pour conserver les épitopes phospho. Validez la spécificité de la coloration en la comparant avec la coloration du CDK2 total ou en utilisant des essais de compétition peptidique.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection ; titrez avec soin et confirmez la linéarité pour la détection quantitative du Phospho-CDK2-T160.

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