Anti-Phospho-CBL-Y774 pAb de lapin - P22681

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CBL

• CBL (proto-oncogène casitas B-lineage lymphoma) est une ubiquitine-protéine ligase E3 de type RING qui agit comme régulateur négatif de nombreuses voies de signalisation. Elle médie l'ubiquitination des récepteurs de surface cellulaire et des kinases associées, ce qui conduit à leur dégradation par le protéasome (PubMed : 10514377, 11896602, 14661060, 14739300, 15190072, 18374639, 21596750). Références associées : PMID : 10514377 PMID : 11896602 PMID : 14661060 PMID : 14739300 PMID : 15190072 PMID : 18374639 PMID : 21596750

• Les substrats spécifiques de CBL incluent les récepteurs à activité tyrosine kinase (par exemple EGFR, KIT, PDGFR), les kinases de la famille SRC, SPRY2 et des récepteurs immunitaires comme LAG3. Leur ubiquitination module la signalisation en aval ou leur tri cellulaire (PubMed : 17094949, 17974561, 40101708, 28381567). Références associées : PMID : 17094949 PMID : 17974561 PMID : 40101708 PMID : 28381567

• CBL joue un rôle essentiel dans la signalisation hématopoïétique et est indispensable à la différenciation des ostéoclastes et à la résorption osseuse. La phosphorylation sur la Tyr-731 favorise le recrutement de PI3K et est requise pour la fonction des ostéoclastes (PubMed : 14739300). Références associées : PMID : 14739300

• La protéine est localisée dans le cytoplasme, la membrane cellulaire, les cils et l'appareil de Golgi, ce qui correspond à ses rôles dans le trafic endocytaire et l'arrêt de la signalisation au niveau de la membrane plasmique.

• CBL contient un domaine de liaison aux tyrosine kinases N-terminal conservé, un domaine doigt de RING responsable de son activité ligase E3, et une région C-terminale riche en proline avec plusieurs sites de phosphorylation, dont la Tyr-774.

• Cet anticorps reconnaît spécifiquement CBL phosphorylé sur la Tyr-774, une modification qui influence probablement les interactions protéine-protéine et la dynamique de la transduction de signaux.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant à la région autour de la Tyr-774 ; l'anticorps peut détecter préférentiellement CBL activée dans des échantillons compétents pour la signalisation. Pour le Western blot (WB), il est recommandé d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases lors de la lyse cellulaire et de valider la spécificité avec un blocage par peptide non phosphorylé ou un traitement de déphosphorylation.
• Pour l'ELISA, la CBL phosphorylée peut être capturée à partir d'extraits cellulaires dans des conditions non dénaturantes ; l'association avec un anticorps anti-CBL totale permet une analyse ratiométrique de la phosphorylation de la protéine.
• En tant qu'anticorps polyclonal de lapin, il peut présenter une variation d'un lot à l'autre ; validez chaque nouveau lot dans votre système expérimental. Conservez des aliquotes à -20°C ou -80°C pour éviter des cycles de gel-décongélation répétés, et expédiez le produit sur glace pour préserver son activité.
• Aucune donnée de réactivité croisée avec d'autres espèces n'est disponible ; pour des études sur des organismes non humains, vérifiez la réactivité dans votre système modèle.

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