Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Phospho-Camk2-T286 pour WB - Q13554 / Q13557 / Q13555 / Q9UQM7

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Camk2 (CaMKII)

• CaMKII est une sérine/thréonine protéine kinase qui fonctionne comme un complexe holoenzyme, la sous-unité bêta (CAMK2B) jouant un rôle clé dans le développement neuronal et la plasticité (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Références connexes : PMID:16690701, PMID:29100089
• Dans les neurones, CaMKII bêta présente une fonction structurelle indépendante de la kinase en liant et en regroupant les filaments d'actine, essentielle pour la morphogenèse des épines dendritiques et la plasticité synaptique (PubMed:29100089). Références connexes : PMID:29100089
• L'autophosphorylation de CaMKII (y compris au Thr286 dans de nombreuses isoformes) lors de la liaison du Ca2+/calmoduline génère une activité kinase autonome indépendante du Ca2+, critique pour la potentialisation à long terme (LTP) et l'apprentissage dépendant de l'hippocampe (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Références connexes : PMID:16690701, PMID:29100089
• Dans le muscle squelettique, CaMKII bêta régule le transport de Ca2+ du réticulum sarcoplasmique en phosphorylant la triadine et la phospholambane, modulant la fonction musculaire en réponse à l'exercice (PubMed:16690701). Références connexes : PMID:16690701
• En cas de stress du RE, CaMKII bêta phosphoryle le régulateur de la réticulophagie RETREG1 au Ser-151, favorisant son oligomérisation et son activité de clivage membranaire pour la réticulophagie (PubMed:31930741). Références connexes : PMID:31930741
• La protéine se localise dans plusieurs compartiments cellulaires, notamment le cytoplasme, le cytosquelette, le centrosome, la membrane du réticulum sarcoplasmique et les synapses, reflétant ses rôles diversifiés.
• CaMKII bêta est largement exprimée, avec des niveaux élevés dans le cerveau adulte et fœtal ainsi que dans le muscle squelettique, ce qui est cohérent avec ses fonctions dans la neurogenèse et la physiologie musculaire.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide phospho-synthétique autour de T286 de Camk2 humain ; ce site est conservé dans les isoformes CAMK2A/B/G/D et chez la souris, ce qui soutient la réactivité croisée observée. Envisagez de valider l'anticorps dans des lysats de cerveau ou de muscle de souris.
• Pour le western blot, attendez-vous à une bande à environ 54 kDa correspondant au Camk2 phosphorylé. Incluez des contrôles de chargement appropriés et, si possible, un échantillon traité à la phosphatase pour confirmer la spécificité de la phosphorylation.
• Dans l'ELISA, utilisez le peptide phospho comme antigène de revêtement et le peptide non phosphorylé correspondant comme témoin négatif pour évaluer la spécificité.
• Puisque l'anticorps reconnaît une phosphorylation dépendante de l'activation, optimisez les conditions de stimulation (par exemple, traitement avec un ionophore de Ca2+ ou un neurotransmetteur) pour une détection robuste dans les modèles cellulaires.
• Déterminez la dilution de travail optimale pour chaque application de manière expérimentale ; les dilutions de départ recommandées sont généralement de 1:500–1:2000 pour le WB.

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