Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-c-Myc (T58) pour WB, IHC-P, ELISA - P01106

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine proto-oncogène Myc

• La protéine proto-oncogène Myc, également appelée c-Myc, est un membre de la famille des facteurs de transcription à domaine hélice-boucle-hélice et leucine zipper (bHLHZip). Elle est codée par le gène MYC (identifiant génique : 4609) et joue un rôle central dans la progression du cycle cellulaire, l'apoptose et la transformation cellulaire.
• Le c-Myc se lie à l'ADN de manière spécifique à la séquence, reconnaissant la séquence consensus de la boîte E 5'-CAC[GA]TG-3', et active la transcription de nombreux gènes liés à la croissance. Références associées : PMID:24940000 PMID:25956029
• Il se lie directement au promoteur VEGFA et favorise la production de VEGFA, stimulant ainsi l'angiogenèse de bourgeonnement. Références associées : PMID:24940000 PMID:25956029
• Le c-Myc fonctionne comme un régulateur de la reprogrammation des cellules somatiques et contrôle la capacité d'auto-renouvellement des cellules souches embryonnaires.
• Avec le facteur d'initiation de la transcription TAF6L, le c-Myc active l'expression des gènes cibles en favorisant la libération de l'ARN polymérase II en pause.
• Le c-Myc régule positivement la transcription de HNRNPA1, HNRNPA2 et PTBP1, qui modulent à leur tour l'épissage alternatif de la pyruvate kinase PKM, favorisant la production de l'isoforme PKM2. Références associées : PMID:20010808
• La localisation subcellulaire comprend le noyau (nucléoplasme, nucléole), le cytoplasme et les chromosomes, ce qui reflète ses rôles dynamiques dans la transcription et l'organisation du génome.
• Le c-Myc subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation (notamment au niveau de T58), l'acétylation, l'ubiquitination et la glycosylation O-liée, qui régulent étroitement sa stabilité, ses interactions protéiques et son activité transcriptionnelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Étant donné que cet anticorps reconnaît spécifiquement le résidu T58 phosphorylé, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases à votre tampon de lyse et pendant la préparation des échantillons pour préserver le signal phosphorylé.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est de 51 kDa, mais vous pouvez observer des bandes à des poids moléculaires apparents plus élevés (57–65 kDa) en raison des modifications post-traductionnelles ; utilisez toujours un marqueur de poids moléculaire.
• Confirmez la spécificité de l'anticorps en traitant les échantillons avec la protéine phosphatase lambda ou par compétition peptidique avec l'immunogène non phosphorylé, si disponible.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), optimisez les conditions de démasquage antigénique et la dilution de l'anticorps primaire ; une dilution de départ suggérée pour l'immunohistochimie est de 1:50–1:200, mais cela doit être validé dans votre propre système expérimental.
• Cet anticorps est décrit comme réagissant avec des échantillons humains, de souris et de rat ; lorsque vous travaillez avec d'autres espèces, testez la réactivité croisée de manière empirique.

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