Anticorps polyclonal de lapin anti-phospho-BRCA1 (S988) pour IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38398

Spécifications et paramètres de base du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de BRCA1

• La protéine de susceptibilité au cancer du sein de type 1 (BRCA1), également connue sous le nom de protéine du domaine RING 53 (RNF53), est une ubiquitine-protéine ligase E3 qui médie spécifiquement la formation de chaînes polyubiquitine liées par 'Lys-6', jouant un rôle central dans les réponses cellulaires aux dommages de l'ADN. Références associées : PMID:10500182 PMID:12887909 PMID:12890688
• L'hétérodimère BRCA1-BARD1 coordonne diverses voies, y compris la réparation de l'ADN, l'ubiquitination et la régulation transcriptionnelle, pour maintenir la stabilité génomique. Références associées : PMID:12890688 PMID:14976165 PMID:20351172
• BRCA1 est nécessaire pour les arrêts appropriés du cycle cellulaire après irradiation ionisante en phase S et G2, et contribue à la réparation par recombinaison homologue (HRR) via l'interaction avec PALB2 et l'ajustement du chargement de BRCA2-RAD51 aux cassures de l'ADN. Références associées : PMID:10724175 PMID:11836499 PMID:12183412 PMID:19369211
• Il régule la nucléation des microtubules centrosomaux et inhibe la synthèse lipidique en se liant à l'ACACA phosphorylée inactive, empêchant sa déphosphorylation. Références associées : PMID:18056443 PMID:16326698
• Le complexe BRCA1-RBBP8 contrôle l'activation du point de contrôle G2/M via l'ubiquitination de RBBP8, illustrant un mécanisme de régulation directe de la progression du cycle cellulaire après des dommages à l'ADN. Références associées : PMID:16818604
• La localisation subcellulaire comprend le noyau, les chromosomes et le cytoplasme, avec un navettage dynamique dépendant du stade du cycle cellulaire et des signaux de dommages à l'ADN.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation (par exemple, à S988), l'acétylation et l'ubiquitination, qui modulent son activité et ses interactions.
• Les isoformes 1 et 3 sont largement exprimées ; l'isoforme 3 est souvent réduite ou absente dans les lignées cellulaires de cancer du sein et de l'ovaire.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique autour de S988 de la BRCA1 humaine ; la spécificité de l'anticorps pour la forme phosphorylée doit être confirmée par un traitement à la phosphatase ou des essais de compétition.
• Pour l'IHC-P, optimisez la récupération de l'antigène et envisagez d'utiliser des tissus avec une expression connue de BRCA1 (par exemple, sein, ovaire) ; incluez un contrôle négatif utilisant un peptide bloquant non phosphorylé.
• En IF/ICC, la co-coloration avec des marqueurs de dommages à l'ADN ou des marqueurs de phase du cycle cellulaire peut fournir un contexte fonctionnel pour la localisation de BRCA1.
• La détection ELISA de la phospho-BRCA1 peut nécessiter une extraction minutieuse et une normalisation aux niveaux de BRCA1 totaux ; validez la linéarité et la sensibilité dans la matrice d'échantillon pertinente.

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