Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-ATM (S1981) pour WB et ELISA - Q13315

Spécifications et Paramètres Essentiels du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'ATM

• L'ATM est une protéine kinase sérine/thréonine qui agit comme un capteur clé des dommages à l'ADN, activant la signalisation des points de contrôle en réponse aux cassures double-brin (DSB) et aux stress génotoxiques (PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365).
  Références associées :
  PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365

• Elle reconnaît le motif consensus [ST]-Q et phosphoryle de nombreuses cibles en aval, notamment p53/TP53, CHEK2, BRCA1 et d'autres, pour orchestrer la réparation de l'ADN et l'arrêt du cycle cellulaire (PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669).
  Références associées :
  PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669

• Une première étape critique dans la signalisation des DSB est la phosphorylation médiée par l'ATM de l'histone H2AX sur Ser139, marquant la chromatine bordant les sites de cassure (Par similarité).

• L'ATM fonctionne également dans l'exclusion allélique des cellules pré-B, le développement des cellules T et la transduction du signal, et est considérée comme un suppresseur de tumeur.

• La kinase se localise principalement dans le noyau, mais aussi dans des vésicules cytoplasmiques, le centrosome et les peroxysomes, où elle phosphoryle PEX5 pour promouvoir la pexophagie en réponse aux espèces réactives de l'oxygène (ROS) (PMID:26344566).
  Références associées :
  PMID:26344566

• L'ATM phosphoryle ERCC6 pour faciliter le remodelage de la chromatine au niveau des cassures double-brin de l'ADN (PMID:29203878), et phosphoryle TTC5/STRAP sur Ser203 pour induire sa translocation nucléaire après des dommages à l'ADN (PMID:15448695).
  Références associées :
  PMID:29203878, PMID:15448695

• La phosphorylation de DYRK2 par l'ATM au niveau de sites nucléaires protège DYRK2 de l'ubiquitination médiée par MDM2 et de la dégradation protéasomale suite à un stress génotoxique (PMID:19965871).
  Références associées :
  PMID:19965871

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Cet anticorps a été généré contre un phosphopeptide synthétique correspondant au site de phosphorylation S1981 de l'ATM humaine ; la spécificité est attendue uniquement pour la forme phosphorylée.
• Pour le Western blot, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et de lavage pour préserver la phosphorylation. Pensez à vérifier la spécificité phospho en traitant les échantillons avec de la phosphatase lambda ou en réalisant des expériences de blocage par peptide.
• En raison de la grande taille de l'ATM (~351 kDa), utilisez un gel d'acrylamide à faible pourcentage (par ex. 6%) et des temps de transfert prolongés. Un gel gradient (4-15%) peut également améliorer la séparation.
• Validez l'anticorps dans votre système modèle spécifique ; une réactivité croisée avec la souris est rapportée, mais les performances dans d'autres espèces doivent être testées individuellement.
• Pour l'ELISA, confirmez les conditions de coating et de détection, car les anticorps phospho-spécifiques peuvent nécessiter un pH de tampon et des réactifs de blocage optimisés.

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