Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-ATF2 (T69/T71) pour WB, IHC-P, ELISA - P15336

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATF-2

• L'ATF-2 (Activating transcription factor 2), également connu sous le nom de CREB-2, CRE-BP1 et HB16, est un membre de la famille ATF/CREB des facteurs de transcription à domaine bZIP (basic region-leucine zipper), codé par le gène ATF2.
• Il fonctionne comme un activateur transcriptionnel en se liant aux séquences consensus CRE (5'-TGACGTCA-3') ou AP-1 (5'-TGACTCA-3'), régulant les gènes impliqués dans l'anti-apoptose, la croissance cellulaire et la réponse aux dommages à l'ADN.
• Il présente une activité intrinsèque d'histone acétyltransférase (HAT), acétylant spécifiquement les histones H2B et H4 in vitro, contribuant à la modification de la chromatine et à la régulation transcriptionnelle. Références associées : PMID:10821277
• Cet anticorps spécifique à la phosphorylation détecte l'ATF2 phosphorylé sur Thr69 et Thr71 par des kinases telles que l'ATM, ce qui est essentiel pour son rôle dans la réponse aux dommages à l'ADN, le point de contrôle de la phase S induit par les rayonnements ionisants et le recrutement du complexe MRN sur les foyers de dommages à l'ADN.
• Dans le cytoplasme, l'ATF2 se localise sur la membrane mitochondriale externe où il interagit avec HK1 et VDAC1, altérant le potentiel de membrane mitochondriale et favorisant la mort cellulaire, soulignant son double rôle dans la transcription et l'apoptose.
• La protéine est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux plus élevés dans le cerveau, et subit un transport nucléocytoplasmique ; sa localisation subcellulaire comprend le noyau, le cytoplasme et la membrane mitochondriale externe.
• L'ATF2 peut avoir des activités oncogènes ou suppresseurs de tumeurs selon le contexte tissulaire, et il module l'activité de l'ATM en favorisant la dégradation de KAT5 de concert avec CUL3 et RBX1.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été généré contre un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus Thr69 et Thr71 de l'ATF2 humain. Pour une détection spécifique à la phosphorylation, validez la spécificité en traitant les lysats cellulaires avec de la lambda phosphatase ou en utilisant une compétition par peptide non phosphorylé.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire attendu est d'environ 55 kDa. Utilisez des conditions de blocage et de lavage appropriées, et envisagez d'inclure un cocktail d'inhibiteurs de phosphatase dans les tampons de lyse pour préserver la phosphorylation.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), une récupération d'antigène peut être nécessaire ; l'optimisation de la dilution de l'anticorps et du système de détection est recommandée pour chaque type de tissu. Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• La réactivité croisée avec l'ATF2 de souris et de rat permet d'utiliser l'anticorps dans des modèles rongeurs, mais l'alignement des séquences et des expériences pilotes sont conseillés pour confirmer la réactivité.

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