Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-AMPKa1/AMPKa2-T183/T172 pour WB, ELISA - Q13131 / P54646

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'AMPKa1/AMPKa2

• La protéine kinase activée par l'AMP 5' (AMPK) est une sérine/thréonine kinase hétérotrimérique qui agit comme un capteur d'énergie, maintenant l'homéostasie énergétique cellulaire. Les sous-unités catalytiques α (α1 codée par PRKAA1 et α2 par PRKAA2) sont activées par phosphorylation sur Thr-183 (α1) ou Thr-172 (α2) en réponse à l'élévation de l'AMP/ADP et aux kinases en amont. Références connexes : PMID:17307971, PMID:17712357

• L'AMPK régule le métabolisme des lipides en phosphorylant l'acétyl-CoA carboxylase (ACACA/ACACB) et la réductase HMG-CoA, inhibant ainsi la synthèse des acides gras et du cholestérol. Elle favorise également la lipolyse par la phosphorylation de la lipase sensible aux hormones (LIPE).

• Dans l'homéostasie du glucose, l'AMPK améliore le captage du glucose musculaire en favorisant la translocation de SLC2A4/GLUT4 et module la gluconéogenèse hépatique via la phosphorylation de CRTC2/TORC2. Elle régule également les enzymes glycolytiques PFKFB2/3.

• L'AMPK contrôle la croissance et la prolifération cellulaires en inhibant la voie mTORC1 par la phosphorylation de TSC2 et RPTOR, et en phosphorylant FNIP1 pour supprimer la signalisation non canonique de mTORC1, favorisant ainsi l'autophagie via l'activation d'ULK1. Références connexes : PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666

• La kinase phosphorylate de multiples facteurs de transcription et co-régulateurs (par exemple, FOXO3, p53, SREBF1/2, HNF4A, CRTC2, HDAC5, MEF2C, PPARGC1A, EP300) pour exercer des réponses métaboliques et de stress à long terme, et médie la régulation de la chromatine via la phosphorylation de l'histone H2B. Références connexes : PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171

• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le noyau et les endosomes tardifs, permettant à l'AMPK de coordonner les programmes métaboliques et transcriptionnels à travers les compartiments. Elle est également impliquée dans l'initiation de l'autophagie et la dynamique mitochondriale. Références connexes : PMID:34077757, PMID:36367943

• Les fonctions supplémentaires incluent la régulation du rythme circadien via la phosphorylation de CRY1, la signalisation Wnt par la stabilisation de CTNNB1, et l'activité kinase de la protéine tau sous exposition au bêta-amyloïde. L'AMPKα1 est également impliquée dans la ferroptose et les réponses à l'hypoxie par la phosphorylation d'ALDH7A1. Références connexes : PMID:31492851, PMID:40233740

• L'AMPKα1 subit un épissage alternatif et est modifiée par une conjugation de type ubiquitine (Ubl). La protéine est une glycoprotéine et une phosphoprotéine, avec une activité kinase dépendante des métaux nécessitant du magnésium.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'anticorps a été élevé contre un phosphopeptide synthétique entourant le Thr-183 de l'AMPKα1/α2 humaine ; il est conseillé de vérifier la spécificité du phosphate par traitement des lysats cellulaires à la λ-phosphatase ou par compétition peptidique.
• Pour le Western blot, une bande à environ 64–65 kDa (α1) et 62 kDa (α2) est attendue. Des bandes multiples peuvent résulter de variations d'isoformes et d'états de phosphorylation ; utilisez des témoins négatifs appropriés (blocage par peptide non phosphorylé) pour confirmer la spécificité du signal.
• Cet anticorps convient au dosage immuno-enzymatique (ELISA) ; envisagez de le coupler avec un anticorps total anti-AMPKα pour normaliser les signaux phospho dans les approches quantitatives.
• En raison de la forte conservation de la séquence, une réactivité croisée avec l'AMPKα de souris et de rat est rapportée ; validez dans le contexte de l'espèce et du tissu concernés.

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