Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-AKT1 (Thr450) pour WB, ELISA - P31749

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AKT1

• L'AKT1 est le membre fondateur de la famille des kinases sérine/thréonine AKT, qui comprend également l'AKT2 et l'AKT3, et régit des processus fondamentaux tels que le métabolisme, la prolifération, la survie, la croissance et l'angiogenèse (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Références associées : PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Dans la cascade de signalisation de l'insuline, l'AKT1 phosphoryle TBC1D4 pour promouvoir la translocation de GLUT4 et la capture du glucose (PubMed:11994271) et inhibe GSK3 pour stimuler la synthèse du glycogène. Références associées : PMID:11994271
• L'AKT1 soutient la survie cellulaire en phosphorylant directement et en inactivant des protéines pro-apoptotiques telles que MAP3K5/ASK1 (PubMed:11154276) et BAD (PubMed:10926925), et en provoquant la rétention cytoplasmique des facteurs de transcription FOXO (PubMed:10358075). Références associées : PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:10358075
• Grâce à la phosphorylation de TSC2, l'AKT1 active mTORC1, couplant ainsi les signaux des facteurs de croissance à la synthèse protéique, la biogenèse des ribosomes et la croissance cellulaire (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Références associées : PMID:12150915, PMID:12172553
• L'AKT1 fait la navette entre le cytoplasme, le noyau, la membrane plasmique et l'espace intermembranaire mitochondrial ; cette localisation dynamique est essentielle pour accéder à différentes cibles en aval.
• Exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, les niveaux protéiques de l'AKT1 et ses phosphorylations activatrices sont fréquemment élevés dans les cancers, y compris les tumeurs de la prostate et du sein, où ils corrèlent avec la progression tumorale.
• L'AKT1 est soumise à une régulation post-traductionnelle étendue : la phosphorylation sur Thr308 et Ser473 est nécessaire pour une pleine activité kinase, tandis que l'acétylation, l'ubiquitination et la glycosylation modulent davantage sa stabilité et sa fonction.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), préparez les lysats cellulaires ou tissulaires avec des inhibiteurs de phosphatases pour préserver le signal phospho-Thr450 ; une bande spécifique proche de 56 kDa est attendue dans les échantillons humains et murins.
• Dans les applications ELISA, un peptide phospho correspondant à l'immunogène peut être utilisé comme antigène de revêtement pour capturer l'anticorps ; les utilisateurs doivent optimiser les concentrations de revêtement et les dilutions d'anticorps pour leur test spécifique.
• Étant donné que les anticorps polyclonaux peuvent présenter une variabilité d'un lot à l'autre, il est recommandé d'inclure des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, des lysats traités à la phosphatase).
• Cet anticorps est destiné à un usage de recherche pour la détection de la phosphorylation de l'AKT1 ; une validation dans la matrice d'échantillon et le système de test de l'utilisateur final est essentielle pour des résultats fiables.

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