Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-AKT1 (Ser473) pour WB, ELISA - P31749

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation d'AKT1

• AKT1 (RAC-alpha sérine/thréonine-protéine kinase, également connue sous le nom de PKBα) est une sérine/thréonine-protéine kinase appartenant à la famille AKT, qui chez l'homme comprend trois isoformes étroitement liées (AKT1, AKT2, AKT3) qui contrôlent le métabolisme, la prolifération, la survie, la croissance et l'angiogenèse. Références associées : PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136

• Elle agit en aval de la PI3K et transduit les signaux de l'insuline, de l'IGF1, de l'EGF et du PDGF ; elle phosphoryle plus de 100 cibles en aval, dont GSK3, TSC2, les facteurs de transcription FOXO et les composants de la voie mTORC1, coordonnant ainsi le métabolisme du glucose, la synthèse des protéines et l'expression des gènes. Références associées : PMID:12176338, PMID:12964941, PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:21432781

• La phosphorylation de TSC2 sur Ser939 et Thr1462 par AKT1 lève l'inhibition de mTORC1, favorisant la croissance cellulaire et la synthèse des protéines ; à l'inverse, AKT1 phosphoryle et inhibe GSK3α/β pour promouvoir la synthèse du glycogène et la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:12150915, PMID:12172553

• AKT1 favorise la survie cellulaire en phosphorylant et en inactivant des protéines pro-apoptotiques telles que BAD (Ser136) et MAP3K5/ASK1 (Ser83), et en activant CREB1 pour réguler à la hausse les protéines anti-apoptotiques BCL2 et MCL1. Références associées : PMID:10926925, PMID:11154276, PMID:9829964

• Elle régule la dynamique du cytosquelette et la migration cellulaire en phosphorylant des substrats tels que la palladine (PALLD) et SPATA13, influençant le renouvellement de l'adhésion et la motilité. Références associées : PMID:20471940, PMID:19934221

• AKT1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane plasmique et l'espace intermembranaire mitochondrial. Elle est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux élevés de phospho-Ser473 observés dans les cancers de la prostate et du sein, la liant à la signalisation oncogénique.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'anticorps est produit contre un peptide phosphorylé synthétique correspondant aux résidus entourant Ser473 de l'Akt1 humain ; envisagez d'utiliser des lysats traités à la phosphatase ou un anticorps anti-AKT1 non-phosphorylé comme contrôle négatif pour vérifier la spécificité de la phosphorylation.
• En WB, attendez-vous à une bande unique à ~56 kDa ; utilisez des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de cellules stimulées par l'insuline ou l'EGF) et optimisez les quantités chargées et les temps d'exposition.
• Pour l'ELISA, le revêtement de la plaque avec le peptide phosphorylé et le peptide non-phosphorylé peut aider à évaluer la liaison phospho-spécifique ; incluez des étapes de blocage et de lavage pour réduire le bruit de fond non spécifique.
• La réactivité croisée est indiquée pour l'humain, la souris et le rat ; cependant, une validation dans la matrice d'échantillon pertinente de chaque espèce est recommandée.
• Puisque l'anticorps reconnaît la forme phosphorylée d'AKT1, il peut également détecter d'autres isoformes d'AKT (AKT2, AKT3) si l'épitope est conservé ; confirmez la spécificité avec des modèles d'invalidation ou de knock-down isoforme-spécifiques si nécessaire.

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