Anticorps monoclonal anti-Phospho-AKT1-S473 pour WB, IHC-P, ELISA - P31749

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la RAC-alpha sérine/thréonine-protéine kinase (AKT1)

• AKT1 est une sérine/thréonine-protéine kinase qui régule le métabolisme, la prolifération, la survie cellulaire, la croissance et l'angiogenèse par phosphorylation de substrats en aval. Références associées : PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Elle phosphoryle TBC1D4 pour promouvoir le transport du glucose stimulé par l'insuline. Références associées : PMID:11994271
• Par phosphorylation de TSC2, AKT1 active la voie de signalisation mTORC1, améliorant la synthèse protéique. Références associées : PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 favorise la survie cellulaire en phosphorylant MAP3K5/ASK1 sur Ser-83 pour inhiber l'apoptose induite par le stress oxydatif. Références associées : PMID:11154276
• Elle phosphoryle les facteurs de transcription FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4) pour les exclure du noyau, supprimant ainsi l'expression de gènes pro-apoptotiques. Références associées : PMID:10358075
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et l'espace intermembranaire mitochondrial, reflétant ses rôles de signalisation diversifiés.
• AKT1 est exprimée dans tous les types cellulaires humains, avec des niveaux élevés dans les cancers de la prostate et du sein, et la forme phospho-Ser473 est liée à la progression du cancer.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation sur Ser473 et Thr308 pour une activation complète, ainsi que l'acétylation et la glycosylation.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été généré contre un peptide synthétique phosphorylé autour de Ser473 de l'Akt1 humain. La conception de l'immunogène cible la forme activée d'Akt1 ; l'Akt1 non phosphorylé peut ne pas être détecté.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver les états de phosphorylation. Le poids moléculaire prédit est de 56 kDa (P31749).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de démasquage antigénique et la fixation des tissus peuvent influencer la détection du phospho-épitope ; validez sur des tissus témoins positifs connus (par exemple, des spécimens de cancer).
• Pour l'ELISA, assurez-vous que les conditions de revêtement préservent le phospho-épitope ; l'anticorps peut être utilisé en combinaison avec un anticorps de détection de l'Akt1 total pour l'analyse du rapport phospho/total.
• Une réactivité croisée avec l'Akt1 de souris et de rat est attendue sur la base de l'homologie de séquence ; des différences dans l'accessibilité du site de phosphorylation peuvent nécessiter une validation spécifique à l'espèce.

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