Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Phospho-Akt-T308 pour WB, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de AKT (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 est l'une des trois sérine/thréonine-protéines kinases étroitement apparentées (AKT1, AKT2, AKT3) qui régulent des processus critiques tels que le métabolisme, la prolifération, la survie cellulaire, la croissance et l'angiogenèse. Références connexes : PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136

• En tant que nœud central de la signalisation PI3K, AKT phosphoryle plus de 100 substrats en aval sur des résidus sérine/thréonine pour médier les effets de l'insuline, des facteurs de croissance et d'autres stimuli. Références connexes : PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:21432781

• Dans l'homéostasie du glucose, AKT favorise la captation de glucose stimulée par l'insuline via la translocation de SLC2A4/GLUT4 et la synthèse du glycogène en inhibant GSK3A/B ; il phosphoryle également TBC1D4 pour déclencher la liaison 14-3-3 essentielle pour le transport du glucose. Références connexes : PMID:11994271

• AKT favorise la survie cellulaire en phosphorylant et en inhibant les substrats pro-apoptotiques tels que MAP3K5, BAD et les facteurs de transcription FOXO, ce qui entraîne la séquestration cytoplasmique des protéines FOXO et la régulation à la hausse des gènes anti-apoptotiques comme BCL2 et MCL1 via CREB1. Références connexes : PMID:11154276, PMID:10358075, PMID:9829964, PMID:10926925

• AKT active la signalisation mTORC1 en phosphorylant TSC2 et d'autres régulateurs (CASTOR1, DEPDC5), contrôlant ainsi la synthèse des protéines et la croissance cellulaire. Références connexes : PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:31548394, PMID:33594058

• Au niveau subcellulaire, AKT se trouve dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et l'espace intermembranaire mitochondrial, reflétant ses fonctions diverses.

• Chez l'homme, AKT1 est exprimé de manière ubiquitaire, avec des formes phosphorylées élevées observées dans les cancers de la prostate et du sein, suggérant des rôles dans la progression tumorale.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène est un peptide phospho-synthétique autour du Thr308 de l'Akt humain ; la phosphorylation à ce résidu est critique pour l'activation de l'Akt. Par conséquent, l'anticorps est spécifique de la forme phosphorylée et ne doit pas reconnaître l'Akt non phosphorylé.
• Étant donné que Thr308 est conservé à travers les isoformes AKT1, AKT2 et AKT3, l'anticorps est censé réagir de manière croisée avec les formes phosphorylées correspondantes chez la souris et le rat, comme l'indiquent les données de réactivité croisée.
• Pour l'analyse par Western blot, utilisez des inhibiteurs de phosphatases appropriés lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation. Les poids moléculaires prédits des isoformes sont d'environ 48-55 kDa ; confirmez la spécificité de la bande avec des témoins positifs et négatifs (par exemple, cellules stimulées à l'insuline vs non traitées).
• Les applications ELISA peuvent convenir pour capturer ou détecter le phospho-Akt dans les lysats cellulaires ; optimisez les conditions de revêtement et de détection pour votre matrice spécifique.
• Compte tenu du fait que la phosphorylation T308 est dynamique, incluez des témoins expérimentaux appropriés pour évaluer l'activation de la voie de signalisation (par exemple, traitement avec un inhibiteur de PI3K).

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