Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Akt-S473 pour WB, IHC-P, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'AKT1

• AKT1 (protéine kinase RAC-alpha sérine/thréonine) est un membre de la famille des kinases AKT et régule le métabolisme, la prolifération, la survie cellulaire, la croissance et l'angiogenèse en phosphorylant plus de 100 substrats en aval. Références associées : PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136 PMID:21432781
• Il médie l'absorption du glucose induite par l'insuline via la translocation de SLC2A4/GLUT4 et stimule la synthèse de glycogène en inhibant GSK3 par phosphorylation.
• AKT1 favorise la survie cellulaire en phosphorylant et en inhibant les protéines pro-apoptotiques, notamment MAP3K5/ASK1 et BAD. Références associées : PMID:11154276 PMID:10926925
• Il active la voie de signalisation mTORC1 en phosphorylant TSC2, ce qui entraîne une augmentation de la synthèse protéique et de la croissance cellulaire. Références associées : PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et l'espace intermembranaire des mitochondries, ce qui lui permet d'assurer divers rôles de signalisation.
• Son expression est élevée dans les cancers de la prostate et du sein, et la forme phosphorylée sur Tyr-176 est corrélée à la progression tumorale depuis le stade normal jusqu'au stade métastatique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation sur Thr-308 et Ser-473 pour une activation complète, l'acétylation, l'ubiquitination et la formation de ponts disulfure, comme indiqué dans les mots-clés UniProt.
• L'anticorps cible la Ser-473 phosphorylée, un site d'activation critique conservé chez AKT1 (P31749), AKT2 (P31751) et AKT3 (Q9Y243).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de la Ser-473 de l'AKT1 humain ; cette conception garantit une haute spécificité pour l'épitope phosphorylé.
• Pour le Western blot, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases dans le tampon de lyse et envisagez d'utiliser un blocage avec une faible concentration de BSA pour préserver les signaux phosphorylés.
• Pour IHC-P, optimisez la récupération d'antigène (par exemple, tampon citrate pH 6,0) et validez la coloration sur des échantillons présentant une activation connue de la voie AKT, comme les tumeurs déficientes en PTEN.
• Pour ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection ; réalisez des expériences de titrage croisé pour confirmer sa compatibilité avec votre format de test et vos conditions de tampon.
• Incluez toujours des contrôles positifs (par exemple, lysats cellulaires traités à l'insuline ou aux facteurs de croissance) et négatifs (non traités ou traités à la phosphatase) appropriés pour vérifier la spécificité phospho.

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