Anticorps polyclonal de lapin anti-PHGDH pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - O43175

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PHGDH

• La PHGDH (D-3-phosphoglycérate déshydrogénase) est une enzyme métabolique qui catalyse la première étape de la voie de biosynthèse phosphorylée de la L-sérine, convertissant le 3-phospho-D-glycérate en 3-phosphonooxypyruvate.
• De plus, la PHGDH présente des activités de 2-oxoglutarate réductase et de malate déshydrogénase, catalysant l'oxydation réversible du 2-hydroxyglutarate en 2-oxoglutarate et du (S)-malate en oxaloacétate.
• La protéine est codée par le gène PHGDH (aussi appelé PGDH3), localisé sur le chromosome 1 humain.
• Les mots-clés associés à la PHGDH incluent : Biosynthèse d'acides aminés, Biosynthèse de la sérine, NAD, Oxidoréductase, et les modifications post-traductionnelles telles que Acétylation, Protéine phosphorylée, Liaison isopeptidique et Conjugaison Ubl.
• La PHGDH est impliquée dans des variants pathogènes (mot-clé Variante pathogène) et est une cible d'identification protéomique (mot-clé Identification protéomique).
• Le poids moléculaire calculé de la PHGDH est d'environ 57 kDa (UniProt : 56 651 Da).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps correspond aux acides aminés 264-533 de la PHGDH humaine (NP_006614.2), une région du domaine C-terminal. Il est attendu qu'il reconnaisse la PHGDH pleine longueur et éventuellement des variants tronqués contenant cet épitope.
• Pour le Western blot (WB), utilisez des conditions dénaturantes standard et validez la détection avec des contrôles positifs tels que des lignées cellulaires à expression connue de PHGDH (par exemple HeLa, HEK293T). Confirmez la spécificité de la bande proche du poids moléculaire prédit de 57 kDa.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation pour visualiser de manière fiable la localisation de la PHGDH. Incluez des contrôles appropriés pour évaluer la spécificité de l'anticorps.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), vérifiez la capacité de l'anticorps à enrichir la PHGDH à partir de lysats en utilisant les tampons recommandés et confirmez l'efficacité de la capture par WB.
• Lors d'une utilisation en ELISA, associez l'anticorps à un anticorps de détection adapté et validez-le par rapport à la PHGDH recombinante ou aux cibles endogènes dans les matrices d'échantillons.

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