Anticorps monoclonal Anti-PHF8 pour WB, ELISA - Q9UPP1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PHF8

• PHF8 (KDM7B/JHDM1F/ZNF422) est une lysine histone déméthylase qui élimine préférentiellement les marques mono- et diméthylées sur H3K9 et H4K20, convertissant la chromatine répressive en un état actif. Références associées : PMID:20101266, PMID:20208542, PMID:20346720
• Il est essentiel pour la progression du cycle cellulaire en contrôlant la transition G1-S, et pour la transcription de l'ADN ribosomique en tant que coactivateur de l'ARN polymérase I. Références associées : PMID:20622854, PMID:20531378
• L'activité déméthylase sur H3K9me2 est fortement stimulée par la liaison à H3K4 triméthylé (H3K4me3), ce qui constitue une signature de chromatine active. Références associées : PMID:20023638, PMID:20346720, PMID:20421419
• PHF8 agit en synergie avec le facteur de transcription ARX pour réguler positivement KDM5C, favorisant l'enrichissement en H3K4me3 au niveau des éléments régulateurs. Références associées : PMID:31691806
• La protéine est localisée dans le noyau et le nucléole, ce qui est cohérent avec ses rôles de régulation de la chromatine et de l'ADNr.
• Elle possède un doigt PHD qui se lie à H3K4me3, un domaine catalytique JmjC et un domaine à doigt de zinc (ZNF422), ce qui la classe comme régulateur de la chromatine.
• Nécessaire pour le développement cérébral normal ; les mutations perte de fonction sont liées à la déficience intellectuelle liée à l'X (MRXSSD).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 800-900 de PHF8 humain, ce qui indique que l'anticorps peut reconnaître la région C-terminale de la protéine.
• Pour le Western blot, PHF8 a une masse moléculaire prédite d'environ 118 kDa ; assurez-vous d'utiliser un pourcentage de gel et des conditions de transfert adaptés aux protéines de haut poids moléculaire.
• Compte tenu de sa localisation nucléaire, une extraction nucléaire ou des lysats cellulaires totaux sont recommandés pour la détection ; pensez à valider dans des lignées cellulaires humaines et murines exprimant PHF8 (par exemple HeLa, HEK293, fibroblastes embryonnaires de souris).
• Pour l'ELISA, les formats direct ou sandwich peuvent être utilisés ; il est conseillé d'optimiser la concentration de l'antigène de revêtement et de l'anticorps.
• En tant que modification d'histone à expression dépendante du cycle cellulaire, l'intensité du signal peut varier ; incluez des contrôles de charge appropriés et normalisez par rapport au nombre de cellules ou à la quantité totale de protéine.

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