Anticorps polyclonal de lapin anti-PEX12 pour Western blot et ELISA - O00623

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PEX12

• PEX12, également appelée péroxine-12 ou PAF-3, est un composant du canal de rétrotranslocation des peroxysomes qui, avec PEX2 et PEX10, assure l'exportation du récepteur PEX5 de la membrane peroxysomale vers le cytosol, permettant ainsi son recyclage (PubMed:24662292, PubMed:9354782, PubMed:9632816). Références associées : PMID:24662292 PMID:9354782 PMID:9632816

• PEX12 régule le recyclage de PEX5 en activant l'activité de ligase E3 de l'ubiquitine-protéine de PEX10 ; lorsque le recyclage est compromis, elle stimule la polyubiquitination de PEX5 médiée par PEX10 en vue de sa dégradation (PubMed:24662292 ; stimulation de l'ubiquitination par similitude). Références associées : PMID:24662292

• La péroxine-12 est une protéine membranaire intégrale localisée dans la membrane des peroxysomes.

• Les mutations de PEX12 sont associées à des troubles de la biogenèse des peroxysomes, notamment au spectre du syndrome de Zellweger.

• La protéine contient des domaines en doigt de zinc et des hélices transmembranaires, ce qui indique des rôles dans la liaison aux métaux et l'intégration membranaire.

• Le poids moléculaire prédit de PEX12 est d'environ 40,8 kDa (UniProt), ce qui est cohérent avec les 41 kDa indiqués pour le produit.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène utilisé correspond à la région C-terminale (acides aminés 290 à 359) de la PEX12 humaine ; cette sélection d'épitope peut favoriser la détection de la protéine entière.
• Pour le Western blot, validez l'anticorps sur des lignées cellulaires humaines exprimant des protéines peroxysomales, telles que HepG2 ou HeLa, et incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser l'immunogène recombinant comme antigène de référence afin d'établir des courbes étalons et d'optimiser les conditions de revêtement.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, une variabilité entre les lots est possible ; il est conseillé de vérifier chaque nouveau lot avec des standards connus.
• La réactivité croisée a été confirmée chez l'humain ; pour les applications impliquant d'autres espèces, une validation expérimentale est recommandée.
• Optimisez expérimentalement les concentrations de travail ; les dilutions initiales courantes pour le WB sont souvent comprises entre 1:500 et 1:2000, mais elles doivent être déterminées de manière empirique.

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