Anticorps polyclonal anti-PEBP1 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P30086

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la PEBP1

• La PEBP1, également connue sous les noms de protéine inhibitrice de la kinase Raf (RKIP) et de peptide cholinergique neurostimulant hippocampique (HCNP), est codée par le gène PEBP1 (également désigné PBP). Elle appartient à la famille des protéines de liaison à la phosphatidyléthanolamine et présente un poids moléculaire d’environ 21 kDa.
• La protéine agit comme un inhibiteur de protéases à sérine, en inhibant la thrombine, la neuropsine et la chymotrypsine, tout en se liant à l’ATP, aux opioïdes et à la phosphatidyléthanolamine, avec une affinité plus faible pour les autres phospholipides.
• La PEBP1 joue un rôle clé dans la régulation négative de la voie RAF/MEK/ERK : elle inhibe l’activité kinase de RAF1 en empêchant son activation, en dissociant le complexe RAF1/MEK et en inhibant compétitivement la phosphorylation de MEK.
• Le précurseur de l’HCNP est transformé pour produire le neuropeptide HCNP, qui augmente la production de choline acétyltransférase dans les neurones cholinergiques présynaptiques sans affecter l’acétylcholinestérase, probablement par l’intermédiaire d’un récepteur spécifique.
• Au niveau subcellulaire, la PEBP1 se localise dans le cytoplasme.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent une phosphorylation (indiquée par le mot-clé « Phosphoprotein ») et un pont disulfure, qui peuvent réguler son activité et sa stabilité.
• Sur le plan tissulaire, l’activité de l’HCNP est associée au système nerveux central, ce qui souligne son rôle en neurobiologie.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1 à 187, soit la quasi-totalité de la longueur de la PEBP1 humaine. Cela suggère que l’anticorps polyclonal peut reconnaître des épitopes répartis sur l’ensemble de la séquence protéique.
• Pour le Western blot, une bande unique autour de 21 kDa est attendue dans les lysats de cellules ou de tissus humains, de souris ou de rat. Utilisez des contrôles de charge appropriés et validez la spécificité dans des échantillons knockout ou knockdown.
• En immunofluorescence/ICC, prévoyez un marquage cytoplasmique. Les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour chaque type cellulaire.
• Pour l’immunoprécipitation, tenez compte de la compatibilité de l’anticorps avec des conditions de protéines natives ou dénaturées. Des expériences préliminaires avec des contrôles positifs et négatifs sont recommandées.
• En raison de sa nature polyclonale, la cohérence entre les lots doit être vérifiée lors du passage à des expériences à grande échelle.

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