Anticorps polyclonal anti-PDK3 pour WB, ELISA - Q15120

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PDK3

• Le gène PDK3 code pour une pyruvate déshydrogénase kinase mitochondriale qui inhibe le complexe pyruvate déshydrogénase par phosphorylation des sous-unités E1 alpha PDHA1 et PDHA2, contrôlant ainsi l'entrée du pyruvate dans le cycle de l'acide tricarboxylique.
• Cette kinase agit comme un commutateur métabolique essentiel, réduisant l'utilisation du glucose et favorisant l'oxydation des acides gras en réponse à un jeûne prolongé ou à un régime riche en graisses, ce qui contribue au maintien de l'homéostasie glucidique.
• PDK3 est l'une des quatre isoformes de PDK (PDK1-4) qui régulent différemment le complexe pyruvate déshydrogénase selon les tissus et les états métaboliques.
• La préprotéine PDK3 est ciblée vers la matrice mitochondriale, où elle exerce sa fonction régulatrice sur le complexe pyruvate déshydrogénase.
• PDK3 est une kinase liant l'ATP appartenant à la famille des transferases ; elle pourrait également contribuer à la génération d'espèces réactives de l'oxygène.
• L'expression tissulaire est particulièrement élevée dans le cœur, le muscle squelettique, la moelle épinière et le cerveau fœtal et adulte, ce qui est cohérent avec son rôle dans la modulation du métabolisme des tissus très oxydatifs.
• Les variants pathogènes de PDK3 sont associés à la maladie de Charcot-Marie-Tooth, une neuropathie périphérique, ce qui met en évidence son importance pour la fonction neuronale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 137-406 de la PDK3 humaine, incluant une grande partie du domaine kinase ; cette conception permet de reconnaître à la fois la protéine pleine longueur et d'éventuelles isoformes issues d'épissage alternatif.
• Pour le Western blot, il est recommandé d'utiliser des lysats protéiques issus de tissus à forte expression de PDK3 tels que le cœur, le muscle squelettique ou le cerveau ; optimisez la dilution de l'anticorps à partir d'expériences préliminaires.
• En ELISA, évaluez les protocoles directs ou indirects avec la protéine PDK3 recombinante ou des lysats cellulaires pour confirmer la spécificité de liaison.
• Compte tenu du poids moléculaire prédit d'environ 47 kDa, assurez une séparation adéquate sur gel et vérifiez l'identité de la bande avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• La réactivité croisée avec la PDK3 de souris et de rat est indiquée ; validez-la dans le système d'échantillon concerné si vous travaillez sur plusieurs espèces.

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