Anticorps polyclonal de lapin anti-PDK1/PDPK1 pour WB et ELISA - O15530

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PDK1/PDPK1

• PDK1 (protéine kinase 1 dépendante des 3-phosphoinositides) est une sérine/thréonine kinase qui agit comme kinase maîtresse de la famille des kinases AGC, en phosphorylant et en activant plusieurs cibles en aval. Références associées : PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762

• Elle active des protéines clés de la signalisation telles qu’AKT/PKB, la kinase p70 S6, la p90 RSK, les isoformes de PKC, la SGK et la PAK1, jouant ainsi un rôle central dans la transduction du signal de l’insuline, la régulation de la prolifération cellulaire, de la survie et du métabolisme. Références associées : PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762, PMID:12167717, PMID:9094314

• PDK1 régule négativement la signalisation du TGF-bêta en modulant les interactions et la phosphorylation des protéines SMAD, empêchant l’accumulation nucléaire de SMAD3 et de SMAD4. Références associées : PMID:17327236

• Elle active la voie NF-kappa-B via la phosphorylation d’IKKB et régule la dynamique des adhérences focales par phosphorylation de la tyrosine. Références associées : PMID:16207722, PMID:14585963

• PDK1 est essentielle à la motilité et à la chimiotaxie des cellules endothéliales vasculaires, participe à l’entrée du calcium et à la fonction des mastocytes, et joue un rôle critique dans l’homéostasie cardiaque et le développement des thymocytes. Références associées : PMID:17371830

• Au niveau subcellulaire, PDK1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et les adhérences focales, ce qui lui permet d’exercer ses diverses fonctions de signalisation.

• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation, la phosphorylation, notamment de Tyr-9, élevée dans les tissus malades, ainsi que la conjugaison à l’ubiquitine.

• PDK1 est exprimée de manière ubiquitaire, et la forme phosphorylée sur Tyr-9 est nettement augmentée dans les tissus pulmonaires, hépatiques, coliques et mammaires malades par rapport aux tissus normaux.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 409 à 556 de la PDK1 humaine, une région située dans la partie C-terminale du domaine kinase. Il convient de considérer que l’anticorps peut reconnaître les formes phosphorylées et non phosphorylées de PDK1 ; les états de phosphorylation spécifiques doivent être validés indépendamment.
• Pour le Western blot, une bande d’environ 63 kDa est attendue. Utilisez des contrôles de charge appropriés et validez la détection dans des lysats cellulaires humains, murins ou de rat. Pour l’ELISA, veillez à optimiser les conditions de revêtement et le titrage de l’anticorps.
• Compte tenu du rôle de PDK1 dans la signalisation de l’insuline et des facteurs de croissance, envisagez de stimuler les cellules avec de l’insuline ou du sérum afin d’évaluer les changements liés à l’activation de la voie dans l’expression ou la phosphorylation de PDK1.

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