Anticorps polyclonal de lapin anti-PDK1/PDHK1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q15118

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PDK1/PDHK1

• PDK1 (pyruvate déshydrogénase kinase isozyme 1) est une kinase mitochondriale qui phosphoryle les sous-unités de la pyruvate déshydrogénase PDHA1 et PDHA2, jouant un rôle clé dans la régulation du métabolisme du glucose et des acides gras et de l'homéostasie. Références associées : PMID:7499431, PMID:18541534, PMID:22195962

• En inhibant l'activité de la pyruvate déshydrogénase, PDK1 régule à la baisse la respiration aérobie, supprime la formation d'acétyl-coenzyme A à partir du pyruvate et régule le flux des métabolites à travers le cycle tricarboxylique. Références associées : PMID:18541534, PMID:22195962, PMID:26942675

• PDK1 joue un rôle important dans les réponses cellulaires à l'hypoxie et est nécessaire à la prolifération cellulaire dans des conditions de faible oxygène, aidant ainsi les cellules à s'adapter et à survivre dans des environnements hypoxiques. Références associées : PMID:18541534, PMID:22195962, PMID:26942675

• La protéine est localisée dans la matrice mitochondriale, ce qui la place à proximité immédiate de son substrat, le complexe pyruvate déshydrogénase, pour un contrôle réglementaire rapide.

• Spécificité tissulaire : PDK1 est majoritairement exprimée dans le cœur, avec des niveaux plus faibles détectés dans le foie, le muscle squelettique et le pancréas, ce qui est cohérent avec son rôle dans les tissus à forte demande métabolique.

• PDK1 est une phosphoprotéine qui subit un épissage alternatif, ce qui suggère des niveaux supplémentaires de régulation fonctionnelle et une diversité d'isoformes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une région C-terminale (acides aminés 337‑436) de la PDK1 humaine, qui est probablement conservée entre les isoformes. Tenez compte de cette conception lors de l'évaluation de la spécificité des isoformes dans votre système expérimental.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 49 kDa. Assurez une lyse cellulaire et une dénaturation complètes pour libérer les protéines mitochondriales ; envisagez d'utiliser un tampon RIPA ou des lysats mitochondriaux enrichis pour améliorer la détection.
• Dans les applications IF/ICC, effectuez une co-coloration avec des marqueurs mitochondriaux (par exemple, MitoTracker ou un anticorps anti-COX IV) pour confirmer la localisation attendue du signal PDK1.
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et de détection en utilisant une protéine recombinante PDK1 standard, et validez la linéarité et la sensibilité dans votre matrice d'échantillon.
• Lorsque vous travaillez avec des tissus de souris ou de rat, n'oubliez pas que les différences de séquence spécifiques à l'espèce peuvent affecter l'affinité de l'anticorps ; vérifiez les performances dans chaque nouveau système avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.

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