Anticorps polyclonal de lapin anti-PDGFRA/PDGFR alpha pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16234

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PDGFR alpha

• Le PDGFR alpha (CD140a, PDGFR2) est un récepteur tyrosine-kinase de surface cellulaire codé par le gène PDGFRA, servant de récepteur de haute affinité pour les facteurs de croissance dérivés des plaquettes PDGFA, PDGFB et PDGFC.
• La liaison du ligand induit la dimérisation du récepteur et l'autophosphorylation, activant des cascades de signalisation en aval clés, notamment les voies RAS/MAPK, PI3K/AKT, PLCG1 et STAT, afin de réguler la prolifération cellulaire, la survie, la migration et la chimiotaxie.
• Joue un rôle essentiel dans le développement embryonnaire, en particulier dans le développement squelettique, la fermeture céphalique et la morphogenèse du tractus gastro-intestinal, et est également nécessaire pour la différenciation des cellules souches mésenchymateuses.
• Présente des rôles duaux dépendant du contexte, capable de promouvoir ou d'inhiber la prolifération et la migration cellulaires en fonction de l'environnement cellulaire et de la composition des ligands.
• Impliqué dans la cicatrisation des plaies et la biologie des plaquettes, contribuant à l'activation plaquettaire, la sécrétion d'agonistes et l'agrégation induite par la thrombine.
• Des isoformes issues d'un épissage alternatif existent ; le récepteur canonique de pleine longueur se localise principalement à la membrane cellulaire, mais se trouve également dans l'appareil de Golgi et le cil primaire, indiquant un trafic intracellulaire et une compartimentation de la signalisation.
• Large expression dans les tissus, avec détection dans le cerveau, les fibroblastes, le muscle lisse, le cœur, les plaquettes, et les tissus coliques normaux et tumoraux, soulignant ses rôles à la fois en physiologie normale et en oncogenèse.
• Modifié post-traductionnellement par phosphorylation, glycosylation, formation de ponts disulfures et ubiquitination, qui régulent l'activité du récepteur, sa stabilité et sa sortie de signalisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre le domaine intracellulaire (aa 896-1059), rendant cet anticorps adapté pour détecter le PDGFR alpha total en Western blotting dans des conditions réductrices ; la bande prédite est d'environ 123 kDa, mais la glycosylation peut provoquer un décalage.
Pour l'immunohistochimie sur coupes de paraffine (IHC-P), envisagez une récupération d'antigène induite par la chaleur car les récepteurs membranaires peuvent être masqués ; testez plusieurs tampons de récupération pour optimiser le signal.
• Lorsqu'il est utilisé en immunofluorescence/ICC, attendez-vous à un marquage membranaire et possiblement périnucléaire (Golgi) ; validez la spécificité avec des contrôles appropriés, tels que des lignées cellulaires avec knockdown ou knockout de PDGFRA.
• Cet anticorps peut reconnaître le PDGFR alpha humain et rongeur (souris/rat), mais la réactivité croisée avec d'autres espèces doit être vérifiée expérimentalement.
Pour ELISA, les performances dépendent de la méthode de revêtement et du couplage des anticorps ; un test pilote avec la protéine recombinante PDGFR alpha est recommandé pour établir les concentrations de travail optimales.

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