Anticorps Polyclonal Anti-PDGFB pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P01127

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du PDGFB

• Le PDGFB, également connu sous le nom de PDGF-2, chaîne B du facteur de croissance dérivé des plaquettes, polypeptide bêta et proto-oncogène c-Sis, est un facteur de croissance sécrété codé par le gène PDGFB (synonymes : PDGF2, SIS).
• Il fonctionne comme un puissant mitogène pour les cellules mésenchymateuses, stimulant la prolifération cellulaire, la migration, la survie et la chimiotaxie lors du développement embryonnaire et de l'homéostasie tissulaire. Références connexes : PMID:26599395
• Le PDGFB est essentiel au développement vasculaire normal : il est nécessaire à la prolifération et au recrutement des péricytes et des cellules musculaires lisses vasculaires dans le système nerveux central, la peau, le poumon, le cœur et le placenta, ainsi qu'à la formation des vaisseaux sanguins et des glomérules rénaux.
• Il joue un rôle critique dans la cicatrisation des plaies, où il stimule la chimiotaxie et la prolifération des fibroblastes et des cellules musculaires lisses.
• La signalisation du PDGFB est modulée par la formation d'hétérodimères avec le PDGFA (sous-unité A du facteur de croissance dérivé des plaquettes), modifiant la liaison au récepteur et les effets en aval.
• La protéine est sécrétée et contient des ponts disulfure caractéristiques et une glycosylation, contribuant à sa stabilité et à sa dimérisation.
• L'expression tissulaire est la plus élevée dans le cœur, la substance noire du cerveau, le placenta et le rein fœtal, avec des niveaux modérés dans l'hippocampe, le muscle squelettique, le rein adulte et le poumon.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 140 à 241 du PDGFB humain, qui devrait reconnaître à la fois la forme précurseur et la forme mature de la protéine.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 27 kDa est attendue dans des conditions réductrices. Dans des conditions non réductrices, des formes dimériques peuvent apparaître à des poids moléculaires plus élevés en raison des ponts disulfure interchaînes ; envisagez de comparer les conditions réductrices et non réductrices pour distinguer les populations monomériques et dimériques.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), une récupération de l'antigène (par exemple, tampon citrate médié par la chaleur) est recommandée en raison de la nature sécrétée du PDGFB ; une perméabilisation est requise pour la détection intracellulaire.
• Pour l'ELISA, utilisez un antigène de revêtement correspondant à la région de l'immunogène ou la protéine PDGFB recombinante ; effectuez une courbe standard pour déterminer les concentrations optimales des anticorps de capture et de détection.
• Une réactivité croisée est rapportée avec l'humain et le rat ; validez sur la souris ou d'autres espèces si nécessaire, car l'homologie de séquence peut varier.
• Incluez toujours des témoins positifs et négatifs appropriés (par exemple, lysat de cellules surexprimant le PDGFB par rapport à un knockout ou un tissu connu pour manquer d'expression) pour confirmer la spécificité.

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