Anticorps polyclonal anti-PDE4A pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27815

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PDE4A

• PDE4A, également connue sous le nom de phosphodiestérase 4A spécifique de l’AMPc, est un membre de la famille des phosphodiestérases 4 qui hydrolyse spécifiquement le second messager AMP 3',5'-cyclique (AMPc) en AMP, régulant ainsi à la baisse les voies de signalisation de l’AMPc.
• L’enzyme joue un rôle essentiel dans la signalisation cellulaire en contrôlant les concentrations intracellulaires d’AMPc et en influençant des processus tels que l’inflammation, la contraction des muscles lisses et les fonctions cognitives.
• PDE4A se caractérise par son indépendance vis-à-vis du calcium, de la calmoduline et des niveaux de GMPc ; elle n’hydrolyse pas le GMPc, ce qui la distingue des autres phosphodiestérases.
• Le gène est soumis à un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes présentant des caractéristiques régulatrices et des distributions tissulaires distinctes.
• Au niveau subcellulaire, PDE4A se localise dans le cytoplasme, la région périnucléaire, le cytosol, la membrane et les projections cellulaires telles que les membranes des ondulations, ce qui indique son implication dans une signalisation compartimentée de l’AMPc.
• Elle est fortement exprimée dans des organes tels que le foie, l’estomac, les testicules, la thyroïde, les glandes surrénales, le cœur et l’intestin grêle, ainsi que dans diverses sous-populations de cellules immunitaires comme les lymphocytes T, les cellules dendritiques, les macrophages et les mastocytes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, l’ubiquitination et la formation de liaisons isopeptidiques ; la protéine lie les ions manganèse et zinc en tant que cofacteurs.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• La séquence de l’immunogène (acides aminés 325-410) correspond à une région située dans le domaine catalytique ; vérifiez la spécificité de l’anticorps vis-à-vis des isoformes souhaitées par WB à l’aide de protéines recombinantes ou de lysats cellulaires provenant des espèces concernées.
• Pour le WB, une bande d’environ 98 kDa est attendue ; envisagez d’utiliser des lysats témoins positifs issus de tissus présentant une forte expression de PDE4A (par exemple, le foie et le cœur) ou de cellules immunitaires stimulées.
• Pour l’IHC-P et l’IF/ICC, incluez des témoins tissulaires négatifs et positifs (par exemple, des tissus humains ou de rongeurs présentant des profils d’expression connus) et optimisez les conditions de démasquage antigénique.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter un titrage soigneux afin d’obtenir un rapport signal/bruit optimal ; la réactivité croisée avec la souris et le rat permet de réaliser des essais multiespèces, mais validez toujours l’anticorps dans votre système expérimental spécifique.

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