Anticorps polyclonal de lapin anti-PDCD4 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q53EL6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PDCD4

• Le PDCD4, également connu sous le nom de H731 ou de protéine inhibitrice de la transformation néoplasique, est un suppresseur de tumeur et un régulateur de l'apoptose codé par le gène PDCD4.
• Il inhibe l'initiation de la traduction et la traduction dépendante de la coiffe en entravant l'interaction entre EIF4A1 et EIF4G et en supprimant l'activité hélicase d'EIF4A.
• Le PDCD4 module l'activation de la kinase JNK et régule à la baisse MAP4K1, affectant la transcription dépendante de MAPK85 et JUN, ce qui est important pour inhiber l'invasion cellulaire.
• La localisation subcellulaire comprend à la fois le noyau et le cytoplasme.
• Il est régulé à la hausse dans les cellules prolifératives et fortement exprimé dans les cellules épithéliales de la glande mammaire, avec une expression réduite dans le cancer du poumon et le carcinome colique, soutenant son rôle de suppresseur de tumeur.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et l'acétylation ; c'est une phosphoprotéine et une protéine conjuguée à l'ubiquitine avec des séquences répétitives.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes.
• Fonctionnellement, il peut jouer un rôle dans l'apoptose et se lie à l'ARN (par similarité).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser une préparation d'échantillon réduit et validez la bande à environ 52 kDa dans des lysats de tissus ou de lignées cellulaires humaines, de souris ou de rat.
• L'immunogène couvre la région N-terminale (aa 1-260) ; par conséquent, l'anticorps peut détecter le PDCD4 de pleine longueur et potentiellement certaines isoformes — confirmez la spécificité avec des contrôles appropriés.
• Pour l'IF/ICC, fixez et perméabilisez les cellules de manière optimale ; notez que le PDCD4 se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, attendez-vous donc à un signal dans les deux compartiments.
• Incluez un contrôle positif tel qu'une lignée cellulaire avec une expression connue de PDCD4 (par exemple, cellules proliférantes ou épithéliales) et un contrôle négatif (par exemple, knockdown de PDCD4) pour vérifier les performances de l'anticorps.
• Les protocoles ELISA peuvent être développés en utilisant la protéine PDCD4 recombinante comme standard ; titrez l'anticorps pour déterminer les concentrations de travail optimales.

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