Anticorps polyclonal de lapin anti-PCSK9 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q80W65

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PCSK9

• La proprotéine convertase subtilisine/kexine de type 9 (PCSK9), également connue sous les noms NARC-1 ou PC9, est une sérine protéase sécrétée appartenant à la famille des proprotéines convertases. Elle est synthétisée sous forme de zymogène et subit un clivage autocatalytique dans le réticulum endoplasmique.
• La PCSK9 est un régulateur crucial de l'homéostasie du cholestérol plasmatique en se liant aux membres de la famille des récepteurs des lipoprotéines de basse densité (LDLR, VLDLR, LRP1, LRP8) et en favorisant leur dégradation intracellulaire, réduisant ainsi la capture du cholestérol LDL.
• Elle améliore la dégradation du LDLR hépatique via une voie dépendante de la clathrine, probablement en empêchant le recyclage du LDLR des endosomes vers la surface cellulaire ou en le dirigeant vers les lysosomes, et peut également induire l'ubiquitination du LDLR.
• Au-delà du LDLR, la PCSK9 inhibe la dégradation intracellulaire de l'apolipoprotéine B (APOB) via une voie autophagosome/lysosome indépendante du LDLR et participe à l'élimination des intermédiaires non-acétylés de BACE1 dans la voie sécrétrice précoce.
• La PCSK9 module l'absorption de Na+ médiée par le canal sodium épithélial (ENaC) en diminuant son expression de surface via une dégradation protéasomale accrue, et régule l'apoptose neuronale via une signalisation anti-apoptotique dépendante de LRP8/APOER2.
• Au niveau subcellulaire, la PCSK9 se localise dans le cytoplasme, est sécrétée, et est associée aux endosomes, lysosomes, surface cellulaire, réticulum endoplasmique et appareil de Golgi, reflétant son trafic et sa diversité fonctionnelle.
• Son expression tissulaire est importante dans les hépatocytes, les cellules mésenchymateuses du rein, les épithéliums de l'iléon et du côlon intestinal, et les neurones du télencéphale du cerveau embryonnaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 35-694 de la PCSK9 de souris, englobant le domaine catalytique et la région C-terminale ; l'anticorps peut reconnaître à la fois la forme pro- complète (~74 kDa) et la forme mature clivée. Pensez à valider les bandes détectées avec des contrôles appropriés.
• Pour le Western blot, utilisez un gel SDS-PAGE réducteur et attendez-vous à une bande principale autour de 74 kDa dans des lysats de foie de souris ou d'hépatocytes ; l'anticorps présente une réactivité croisée avec les protéines humaine et de rat, mais confirmez la réactivité dans votre espèce cible.
• Dans les expériences d'IF/ICC, la PCSK9 présente une distribution cytoplasmique ponctuée et périnucléaire cohérente avec les compartiments du RE, de l'appareil de Golgi et des endosomes. Une perméabilisation est nécessaire ; optimisez la fixation et la dilution de l'anticorps pour votre type cellulaire.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection pour mesurer la PCSK9 dans les surnageants cellulaires ou les fluides biologiques. Validez les conditions du test avec des standards de PCSK9 recombinante.

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