Anticorps polyclonal anti-PCSK9 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q8NBP7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PCSK9

• PCSK9 (Proprotéine convertase subtilisine/kexine de type 9) est un régulateur essentiel de l'homéostasie du cholestérol plasmatique : elle se lie aux membres de la famille des récepteurs LDL (LDLR, VLDLR, LRP1, LRP8) et favorise leur dégradation dans les compartiments acides intracellulaires. Références associées : PMID:18039658

• Elle agit par un mécanisme non protéolytique pour améliorer la dégradation du LDLR hépatique par la voie médiée par la clathrine/LDLRAP1, empêchant potentiellement le recyclage du LDLR ou le dirigeant vers les lysosomes. Références associées : PMID:17461796, PMID:18197702, PMID:18799458

• PCSK9 inhibe également la dégradation intracellulaire d'APOB par la voie autophagosome/lysosome d'une manière indépendante du LDLR, et participe à l'élimination de BACE1 dans la voie de sécrétion précoce. Références associées : PMID:18660751

• La protéine se localise dans de multiples compartiments sous-cellulaires, notamment le cytoplasme, la fraction sécrétée, l'endosome, le lysosome, la surface cellulaire, le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi, ce qui reflète son trafic dynamique.

• En tant que membre de la famille des sérines protéases subtilisine/kexine, PCSK9 subit un clivage autocatalytique entre le prodomaine et le domaine catalytique, et présente des modifications post-traductionnelles telles que la glycosylation, la phosphorylation, la sulfatation et la formation de ponts disulfures.

• Outre son rôle dans le métabolisme du cholestérol, PCSK9 régule l'apoptose neuronale en modulant les niveaux de LRP8/APOER2 et la signalisation anti-apoptotique associée, et inhibe l'absorption de Na+ médiée par ENaC.

• Son expression tissulaire est observée dans le neuroépithéliome, le carcinome colique, les lignées cellulaires hépatiques et pancréatiques, ainsi que les cellules de Schwann, ce qui est cohérent avec ses rôles dans le métabolisme des lipides et des stéroïdes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 31-692 de la PCSK9 humaine, incluant le domaine catalytique et la région C-terminale ; cette large région peut permettre d'obtenir une réactivité robuste. Réalisez une titration et une validation dans votre système d'échantillon adapté.

• Pour le Western blot, notez que PCSK9 peut être détectée sous forme d'une protéine complète d'environ 74 kDa et d'un fragment d'environ 20 kDa, correspondant probablement au prodomaine clivé. Des bandes supplémentaires peuvent apparaître selon la préparation de l'échantillon et le clivage endogène. Confirmez le profil des bandes à l'aide de contrôles appropriés.

• Pour l'immunofluorescence et l'immunoprécipitation, sélectionnez une dilution d'anticorps compatible avec votre protocole et votre type cellulaire ; incluez des contrôles positifs et négatifs pour évaluer la spécificité.

• Ce fournisseur indique que cet anticorps réagit avec la PCSK9 humaine et de rat. Lors de tests sur d'autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence et réalisez une validation empirique de la réactivité croisée.

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