Anticorps Polyclonal Anti-PCMT1 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P22061

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du PCMT1

• PCMT1 (Protéine L-isoaspartate(D-aspartate) O-méthyltransférase), également connu sous le nom de PIMT, est codé par le gène PCMT1 (UniProt P22061) et fonctionne comme une méthyltransférase de réparation.
• Il initie la réparation des protéines endommagées en catalysant la méthylation par esterification des résidus anormaux L-isoaspartyle et D-aspartyle qui s'accumulent spontanément dans les peptides et protéines au cours du vieillissement. Références connexes : PMID:3167043, PMID:6469980
• Les substrats connus incluent EIF4EBP2, la protéine associée aux microtubules 2, la calréticuline, les chaînes légères de clathrine, l'isozyme L1 de l'hydrolase ubiquitine C-terminale, la protéine 1 liant la phosphatidyléthanolamine, la stathmine et les synucléines (par similitude).
• Se localise principalement dans le cytosol, ce qui est cohérent avec son rôle dans la réparation des protéines intracellulaires.
• Appartient à la superfamille des méthyltransférases, utilisant la S-adénosyl-L-méthionine comme donneur de méthyle ; l'enzyme est également sujette à l'acétylation et subit un épissage alternatif.
• Le poids moléculaire calculé de la protéine non modifiée est d'environ 24,6 kDa ; l'anticorps détecte une bande endogène autour de 25 kDa.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 62 à 286 du PCMT1 humain, une région conservée ; l'anticorps est censé reconnaître le PCMT1 de pleine longueur ainsi que les isoformes partageant cet épitope.
• Pour le western blot (WB), envisagez d'utiliser un protocole standard SDS-PAGE réducteur et validez la détection dans votre espèce cible ; les réactivités rapportées incluent l'humain, la souris et le rat.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation car le signal peut être influencé par le contexte cellulaire ; incluez des témoins appropriés.
• Cet anticorps polyclonal convient à l'immunoprécipitation (IP) et à l'ELISA ; cependant, les conditions de chaque essai (par exemple, la dilution de l'anticorps, le temps d'incubation) doivent être déterminées empiriquement.
• La réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été entièrement caractérisée ; lors de travaux avec des tissus non vérifiés, effectuez une expérience pilote.

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