Anticorps polyclonal de lapin anti-PCK1 pour WB - P35558

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PCK1

• Catalyse la décarboxylation réversible et la phosphorylation de l'oxaloacétate en phosphoénolpyruvate (PEP), agissant comme l'enzyme limitante de la gluconéogenèse.
  Références connexes : PMID:24863970, PMID:26971250, PMID:28216384
• Régule le cataplerosisme et l'anaplerosisme : à faible teneur en glucose, convertit l'oxaloacétate en PEP ; à haute teneur en glucose, favorise la réaction inverse pour reconstituer les intermédiaires du cycle de l'acide citrique.
  Références connexes : PMID:30193097
• Agit comme une protéine kinase lorsqu'elle est phosphorylée au niveau de la Ser-90 par AKT1, se transloquant dans le réticulum endoplasmique pour phosphoryler les protéines INSIG, activant ainsi la lipogenèse médiée par SREBP.
  Références connexes : PMID:32322062
• Exprimé principalement dans le foie, les reins et les adipocytes.
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le cytosol et le réticulum endoplasmique.
• Nécessite le GTP et le manganèse comme cofacteurs ; subit une acétylation, une phosphorylation et une ubiquitination qui modulent l'activité et la stabilité.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes présentant une diversité fonctionnelle potentielle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, optimisez la dilution entre 1:500 et 1:2000 en utilisant des lysats de foie ou de rein comme témoins positifs. La bande prédite est d'environ 69 kDa.
• Pour l'immunoprécipitation, envisagez d'utiliser 1 à 2 µg d'anticorps pour 500 µg de lysat dans des conditions standard non dénaturantes.
• Pour l'immunofluorescence, fixez et perméabilisez les cellules ; le signal PCK1 est attendu dans le cytoplasme et le réticulum endoplasmique, et non à la membrane plasmique.
• ELISA : L'anticorps peut être utilisé comme réagent de capture ou de détection ; le couplage avec un anticorps apparié validé est recommandé pour les dosages sandwich.
• Validez la réactivité croisée dans les échantillons de souris et de rat avant les études à grande échelle.

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