Anticorps monoclonal de lapin anti-PBEF/Visfatin/NAMPT pour WB, IHC-P, ELISA - P43490

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PBEF/Visfatin/NAMPT

• PBEF/Visfatin/NAMPT, également connue sous le nom de nicotinamide phosphoribosyltransférase, est une protéine de 56 kDa qui agit comme l’enzyme limitante de la biosynthèse du NAD chez les mammifères, en catalysant la condensation de la nicotinamide avec le 5-phosphoribosyl-1-pyrophosphate pour produire du mononucléotide de nicotinamide.
• Outre son rôle enzymatique, la forme sécrétée de NAMPT agit comme une cytokine (PBEF) dotée de propriétés immunomodulatrices et comme une adipokine (visfatine) pouvant avoir des effets antidiabétiques ; cette forme est dépourvue d’activité enzymatique en raison de la faible disponibilité de l’ATP dans l’espace extracellulaire.
• NAMPT contribue à la régulation de l’horloge circadienne en favorisant une production oscillatoire de NAD, qui module l’activité de l’hétérodimère CLOCK-BMAL1 par désacétylation médiée par SIRT1, influençant ainsi l’expression rythmique des gènes.
• La protéine se localise dans le noyau et le cytoplasme, et elle est également sécrétée ; sa distribution subcellulaire est cohérente avec ses rôles bifonctionnels dans le métabolisme et la signalisation intercellulaire.
• NAMPT est fortement exprimée dans la moelle osseuse, le foie et les muscles, et est également présente dans le cœur, le placenta, les poumons et les reins, ce qui reflète l’étendue de ses fonctions métaboliques et immunologiques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité enzymatique, sa stabilité ou sa sécrétion dans différentes conditions physiologiques.
• Sur le plan structural, NAMPT appartient à la famille des glycosyltransférases, et sa structure tridimensionnelle a été déterminée, fournissant des informations sur la liaison au substrat et le mécanisme catalytique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 300 à 400 de la NAMPT humaine ; il convient de tenir compte de l’accessibilité de l’épitope dans les conditions natives et dénaturées lors de la planification des expériences.
• Pour le Western blot, une bande proche de 56 kDa est attendue ; validez le résultat avec des lysats appropriés de tissus humains, murins ou de rat, et utilisez des témoins positifs et négatifs pour confirmer la spécificité.
• Pour l’IHC-P, des méthodes appropriées de démasquage antigénique peuvent être nécessaires ; envisagez des tests sur des tissus présentant une expression élevée connue (par exemple, le foie et la moelle osseuse) et incluez des témoins d’isotype.
• Pour les applications ELISA, l’association de cet anticorps avec un réactif de détection ciblant un épitope non chevauchant pourrait permettre le développement d’un dosage en sandwich ; validez le système dans des matrices d’échantillons pertinentes.

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