Anticorps polyclonal anti-PARP1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P09874

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PARP1

• PARP1 est une enzyme nucléaire très conservée qui catalyse le transfert d'ADP-ribose du NAD+ vers des protéines cibles, jouant un rôle central dans la réparation des cassures simple brin de l'ADN via la voie de réparation par excision de bases (BER). Références associées : PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Il participe également à la réparation des cassures double brin par recombinaison homologue, favorisant le recrutement de facteurs de réparation sur les sites de dommage. Références associées : PMID:26344098, PMID:30356214
• En réponse à un dommage de l'ADN, PARP1 médie l'ADP-ribosylation sérine des histones, facilitant la décompaction de la chromatine et l'accès des facteurs de réparation ; cette activité dépend de son cofacteur HPF1. Références associées : PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:32028527
• Au-delà de la réparation de l'ADN, PARP1 fonctionne comme régulateur transcriptionnel, réprimant ou activant la transcription en modulant la structure de la chromatine ou les facteurs d'élongation. Références associées : PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882
• PARP1 est un médiateur clé du parthanatos, une voie de mort cellulaire indépendante des caspases ; lors de l'apoptose, le clivage par la caspase-3/7 génère un fragment qui se transloque dans le cytoplasme et déclenche la mort cellulaire médiée par AIFM1. Références associées : PMID:33168626
• La protéine se localise principalement dans le noyau et sur les chromosomes, et est également présente dans le nucléole ; elle peut également se déplacer vers le cytoplasme dans certaines conditions.
• PARP1 subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, en particulier l'auto-poly-ADP-ribosylation qui régule son activité ; il contient également plusieurs motifs à doigt de zinc essentiels pour la liaison à l'ADN.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 81-390) se trouve dans le domaine de liaison à l'ADN ; vérifiez que l'anticorps reconnaît à la fois PARP1 complet et clivé si vous étudiez l'apoptose.
• Pour le Western blot, PARP1 a un poids moléculaire prédit d'environ 113 kDa ; utilisez des conditions de transfert adaptées aux protéines de grande taille.
• En IF/ICC, assurez une fixation et une perméabilisation correctes pour détecter PARP1 nucléaire ; utilisez une co-coloration avec un marqueur de dommage de l'ADN pour confirmer la localisation.
• Pour l'ELISA, titrez l'anticorps et utilisez des agents de blocage adaptés pour minimiser le bruit de fond.
• La constance d'un lot à l'autre doit être validée, car il s'agit d'un anticorps polyclonal.

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