Anticorps polyclonal de lapin anti-pan 14-3-3 pour WB, ELISA - P27348 / P31946 / P61981 / P62258 / P63104 / Q04917 / P31947

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la famille des protéines 14-3-3

• La famille des protéines 14-3-3 est constituée de protéines adaptatrices hautement conservées qui régulent un large éventail de voies de signalisation générales et spécialisées.
• Ces protéines se lient à des motifs sérine/thréonine phosphorylés présents sur de nombreux partenaires, modulant ainsi leur activité, leur localisation et leur stabilité.
• La protéine 14-3-3 thêta (codée par P27348), également connue sous le nom de protéine 14-3-3 tau ou HS1, est abondamment exprimée dans le cerveau, le cœur et le pancréas, avec des niveaux plus faibles dans les reins et le placenta.
• Au niveau subcellulaire, les protéines 14-3-3 se localisent principalement dans le cytoplasme, où elles interagissent avec diverses molécules de signalisation.
• Les principales modifications post-traductionnelles de la protéine 14-3-3 thêta comprennent l’acétylation, la nitration, la phosphorylation et l’ubiquitination, qui peuvent ajuster finement ses fonctions régulatrices.
• La protéine 14-3-3 thêta régule négativement l’activité kinase de PDPK1 et est surexprimée dans la moelle épinière lombaire de patients atteints de SLA sporadique présentant une atteinte prédominante des motoneurones inférieurs.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, il est recommandé d’envisager une plage initiale de dilution de 1:500 à 1:2000, avec une optimisation par série de dilutions dans le système d’échantillons concerné.
• Lors de l’étude des interactions dépendantes de la phosphorylation, utilisez des tampons de blocage conçus pour les anticorps spécifiques des phosphoprotéines, car les protéines 14-3-3 se lient aux motifs phosphosérine/thréonine.
• Pour les applications ELISA, confirmez la compatibilité de l’antigène de revêtement et validez les performances à l’aide de contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En raison de sa réactivité pan-spécifique, plusieurs bandes proches de 27–28 kDa peuvent apparaître ; vérifiez la spécificité de l’isoforme à l’aide d’anticorps spécifiques de l’isoforme si une discrimination est nécessaire.
• L’utilisation d’un immunogène recombinant de pleine longueur suggère que l’anticorps peut reconnaître les conformations natives et dénaturées ; pour une SDS-PAGE réductrice, ajoutez des agents réducteurs tels que le DTT ou le β-mercaptoéthanol.

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